油松下胚軸不定根誘導研究.pdf

1、油松(Pinus tabuliformis)又叫中國松、紅皮松、短葉松,隸屬松科、松屬,是我國特有的樹種,主要分布在我國吉林、遼寧、河南、河北、山西、山東、內蒙等15個省(市、自治區(qū)),是我國北方廣大地區(qū)最主要的造林樹種之一。另外,油松適應性強,根系發(fā)達,樹姿雄偉,枝葉繁茂,有良好的保持水土和美化環(huán)境的功能。
　　本研究試圖利用組織培養(yǎng)技術,以油松實生苗下胚軸插穗和組培不定芽為材料,通過調節(jié)培養(yǎng)基條件(主要利用生長素),建立調控油

2、松不定根高頻發(fā)生的模式系統(tǒng)。在此基礎上,對油松不定根發(fā)生過程中所伴隨的形態(tài)學、組織學及生理學變化進行研究,旨在為進一步探索油松不定根發(fā)生的內在機制提供實驗依據。研究結果如下:
　　(1)下胚軸比組培不定芽更適合做油松不定根誘導研究的模式材料。分別以油松實生苗下胚軸插穗和組培不定芽作為材料進行不定根誘導試驗,結果發(fā)現,在相同條件下,實生苗下胚軸插穗的不定根發(fā)生率、平均生根條數和最長根長均明顯高于組培不定芽。下胚軸生根率最高可達83.

3、33％,顯著高于所有處理條件下不定芽的生根率。
　　(2)帶全部子葉的下胚軸生根情況顯著優(yōu)于切除部分子葉的下胚軸。在添加了不同濃度IBA的培養(yǎng)基中,帶全部子葉的下胚軸生根率顯著高于切除部分子葉的下胚軸。在含有4 mg/L IBA的1/2 DCR培養(yǎng)基中,帶全部子葉的下胚軸生根率最高,達76.67%,而切除部分子葉的下胚軸生根率只有26.67%。
　　(3)兩周齡的下胚軸比六周齡的下胚軸生根情況好。分別將兩周齡和六周齡的下胚軸

4、培養(yǎng)在含有不同濃度IBA的培養(yǎng)基中,發(fā)現兩周齡的下胚軸生根情況顯著優(yōu)于六周齡的下胚軸,前者生根率最高可達86.67%,而后者生根率最高只有20.00%。
　　(4)IBA促進不定根的發(fā)生,而BA對不定根的形成起抑制作用。在培養(yǎng)基中單一添加不同濃度的IBA時,均不同程度地誘導出了不定根,而且生根率均顯著高于對照,最高可達87.50%。而當在培養(yǎng)基中添加4 mg/L的BA時,無論是否配合添加IBA,都未能成功誘導出不定根。
　　

5、(5)IBA濃度為4 mg/L與預處理15天的組合其生根率顯著高于其它所有處理,生根率高達96.67%。將下胚軸分別在含有不同濃度IBA的培養(yǎng)基中預培養(yǎng)5天、10天和15天,之后再轉入去除激素的相同培養(yǎng)基中進行不定根誘導試驗。結果發(fā)現,在含有相同濃度IBA的條件下,預處理15天的生根情況明顯優(yōu)于其它處理。
　　(6)生根不同階段時間節(jié)點的確立。通過對不定根的發(fā)生過程進行形態(tài)學觀察和解剖學研究發(fā)現,不定根誘導階段為培養(yǎng)0-6天,啟動

6、階段為6-8天,發(fā)育階段為9-15天。油松實生苗下胚軸內無潛伏根原基,不定根由誘導根原基發(fā)育而成,誘導根原基源于木質部棱脊正對的樹脂道周圍的皮層薄壁細胞。
　　(7)不定根發(fā)生過程中伴隨著可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、相關酶活性等生理指標有規(guī)律的變化?？扇苄蕴呛康淖兓癁?根誘導階段先升高后降低,啟動階段一直下降,發(fā)育階段持續(xù)升高;可溶性蛋白含量的變化為:根誘導階段先升高后降低再升高,啟動階段一直升高,發(fā)育階段先升高后降低;PO