太子參、杠柳和甘草不定根培養(yǎng)的研究.pdf

1、太子參iPseudostellariaheterophylla)、甘草(GycyrrhizauralensisFisch.)和杠柳(PeriplocasepiumBunge)均是重要中藥材,應(yīng)用十分廣泛。開展太子參、甘草、杠柳不定根培養(yǎng)對中藥資源保護具有重要意義。
　　本文以太子參根作為外植體直接誘導(dǎo)出不定根,成功建立了太子參不定根的懸浮培養(yǎng)體系,進行了太子參不定根培養(yǎng)條件的優(yōu)化,得到最佳培養(yǎng)條件為6gL-1的接種量、1MS培養(yǎng)基

2、的鹽強度、4％的蔗糖、20mM的NH/和40mM的N〇3_以及1.25mM的磷源。進行了從0.5L搖瓶到3L和5L鼓泡式反應(yīng)器的放大培養(yǎng),和搖瓶相比,反應(yīng)器內(nèi)生物量有了顯著的提高,有效成分含量比搖瓶的略低,太子參不定根中皂苷含量高于栽培品,而多糖含量低于太子參栽培品。
　　在杠柳不定根培養(yǎng)中,進行了搖瓶內(nèi)杠柳不定根生長、杠柳毒苷含量、培養(yǎng)條件和營養(yǎng)消耗的考察。杠柳不定根在第24天時,生物量和杠柳毒苷含量同時達到最大,pH在培養(yǎng)初期

3、急速下降,然后穩(wěn)定在4.0左右,電導(dǎo)率隨著營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,在整個培養(yǎng)周期都是下降趨勢。蔗糖濃度持續(xù)下降,在第12天幾乎全部消耗,葡萄糖和果糖先上升后下降;銨態(tài)氮(NH4+-N)比硝態(tài)氮(N03—-N)更容易被植物吸收,磷源在培養(yǎng)前8天幾乎完全消耗,最后緩慢降至0。
　　以甘草葉片為外植體誘導(dǎo)出不定根,建立了甘草不定根的懸浮培養(yǎng)體系。進行了不定根培養(yǎng)條件的優(yōu)化,得到最佳培養(yǎng)條件為6g.L]的接種量、1/2MS培養(yǎng)基的鹽強度、5%的蔗

4、糖、10mM的NH4+和20mM的NO3-以及1.25mM的磷源。在與甘草栽培品比較中發(fā)現(xiàn),甘草不定根中黃酮類和皂苷類成分低于栽培甘草,多糖類成分高于栽培品。進行了甘草不定根的放大培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)反應(yīng)器培養(yǎng)得到的不定根生物量明顯高于搖瓶。進行了反應(yīng)器培養(yǎng)條件的優(yōu)化,分別考察了培養(yǎng)時間、接種量、通氣量對甘草不定根生長和代謝產(chǎn)物的影響。最佳培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)周期40天,接種量1g.L—1,通氣量為0.4vvm。
　　本文建立了太子參、杠柳和甘