不同日糧纖維對豬腸道微生物多樣性及揮發(fā)性脂肪酸的影響.pdf

1、本文旨在利用T-RFLP技術(shù)研究豬回腸食糜和糞便中微生物多樣性，同時結(jié)合揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)量和組成，比較不同來源日糧纖維對生長豬小腸和大腸微生物多樣性及其代謝的影響。試驗主要分為兩部分。
　　試驗一:T-RFLP技術(shù)參數(shù)適宜性優(yōu)化。本試驗參照T-RFLP通用技術(shù)原理，結(jié)合本實驗室的現(xiàn)有條件，以生長豬回腸食糜和糞便為樣品，從總DNA提取方法、PCR擴(kuò)增條件、限制性內(nèi)切酶的選擇以及T-RFLP數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)，優(yōu)化了適用于豬消化道微生物區(qū)

2、系多樣性檢測的T-RFLP技術(shù)流程，為后續(xù)試驗研究奠定技術(shù)基礎(chǔ)。結(jié)果表明，優(yōu)化后的CTAB提取法可獲得滿足T-RFLP檢測要求的DNA提取物;優(yōu)化后的T-RFLP技術(shù)可以用于豬腸道微生物多樣性及主要微生物種屬初步判斷，且重復(fù)性較好，操作性強(qiáng)。
　　試驗二:日糧纖維來源對生長豬腸道微生物多樣性及其代謝的影響。本試驗按照4×4有重復(fù)拉丁方設(shè)計原理，以裝有回腸末端瘺管的生長豬為動物模型，研究了分別以西蘭花莖葉粉、小麥麩皮、大豆皮和米糠為

3、單一纖維來源的四種纖維來源日糧對生長豬回腸食糜和糞便微生物群落多樣性及揮發(fā)性脂肪酸的影響，同時比較了試驗期（正飼期第1天和第14天）各日糧回腸食糜和糞便微生物多樣性及主要代謝產(chǎn)物的變化動態(tài)。結(jié)果表明，(1)對于回腸微生物區(qū)系的主要微生物組成及多樣性，連續(xù)飼喂14天后，四種纖維日糧差異不顯著(P＞0.05);(2)對于糞便微生物多樣性，連續(xù)飼喂14天后，大豆皮日糧的微生物多樣性指數(shù)與米糠日糧差異顯著，優(yōu)勢度指數(shù)與西蘭花日糧和米糠日糧差異顯

4、著，均勻度指數(shù)與西蘭花日糧差異顯著(P＜0.05);(3)飼喂初期，四種日糧回腸末端食糜中各VFA含量及比例無顯著差異(P＞0.05);飼喂西蘭花日糧14天后，回腸食糜丙酸濃度與米糠日糧差異顯著(P＜0.05);(4)連續(xù)飼喂14天后，大豆皮日糧糞便總VFA、乙酸、丙酸、丁酸含量顯著高于其他三組日糧(P＜0.05);西蘭花日糧總支鏈揮發(fā)性脂肪酸含量、乙酸與丙酸和與丁酸比最高且與米糠日糧差異顯著，乙酸和丙酸比顯著高于其他三種日糧(P＜0.

5、05);米糠日糧戊酸含量較低與西蘭花日糧及大豆皮日糧差異顯著(P＜0.05);(5)試驗前期和試驗后期相比，西蘭花日糧與麥麩日糧回腸香農(nóng)威納多樣性指數(shù)H顯著增加(P＜0.05)，四組日糧糞便香農(nóng)威納指數(shù)H均顯著增加(P＜0.05)，同時，大豆皮日糧糞便樣品均勻度指數(shù)Je，米糠日糧糞便樣品均勻度指數(shù)Je及優(yōu)勢度d指數(shù)顯著增加(P＜0.05)，飼喂14天后，西蘭花日糧回腸食糜丙酸濃度顯著下降(P＜0.05)，而糞便中各VFA含量及比例與前期