高米糠日糧對(duì)蘇淮豬腸道發(fā)育和腸道微生物的影響.pdf

1、隨著我國(guó)畜牧業(yè)持續(xù)快速發(fā)展，以飼喂玉米-豆粕型日糧為主的“杜長(zhǎng)大”飼養(yǎng)模式導(dǎo)致“人畜爭(zhēng)糧”問題日益突出，尋求具有耐粗飼性能的瘦肉型新豬種以及使用來源廣、價(jià)格低的本土飼料資源成為解決該問題的重要途徑。蘇淮豬是我國(guó)新近培育成功的瘦肉型豬種，具備其父本大白豬瘦肉率高的特點(diǎn)，又保留其母本淮豬“耐粗”的特性。但其耐粗飼的具體機(jī)制尚不清楚，推測(cè)與其腸道發(fā)育和微生物有關(guān)。米糠是我國(guó)本土資源豐富的重要能量飼料，雖然粗纖維含量較高，適口性不佳，但我國(guó)傳統(tǒng)

2、地方豬養(yǎng)殖中長(zhǎng)期使用米糠作為飼料原料以節(jié)約成本。并且有研究顯示米糠具有益生元免疫特性，日糧中添加米糠對(duì)豬的腸道免疫有一定影響。但是目前關(guān)于蘇淮豬是否能有效消化以米糠為主要能量來源的高纖維日糧及其腸道發(fā)育和微生物機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)研究;同時(shí)高米糠日糧是否對(duì)蘇淮豬腸道免疫產(chǎn)生影響也尚不清楚。因此，本文選擇日齡（160日齡）、體重(52.60±0.79 kg)相近的48頭純種雌性蘇淮育肥豬作為研究對(duì)象，分為2組，分別飼喂未添加米糠的玉米-豆粕型低

3、纖維日糧和以米糠為主要能量來源的高纖維日糧，飼養(yǎng)75 d。首先研究蘇淮豬對(duì)兩種日糧的消化差異，以及為應(yīng)對(duì)高米糠日糧在腸道結(jié)構(gòu)方面的適應(yīng)性改變（試驗(yàn)一），再分析高米糠日糧對(duì)蘇淮豬大腸纖維分解菌及其代謝產(chǎn)物的影響，從后腸微生物角度探究其高纖維降解潛在機(jī)制（試驗(yàn)二），最后研究高米糠日糧導(dǎo)致的蘇淮豬腸道免疫效應(yīng)（試驗(yàn)三）。
　　1高米糠日糧對(duì)蘇淮豬腸道消化和發(fā)育的影響
　　分別在飼養(yǎng)期第0d、14 d、28 d采集糞便樣品，測(cè)定粗纖

4、維消化率;在第75 d試驗(yàn)期結(jié)束，所有試驗(yàn)豬全部屠宰，分別測(cè)量胃、小腸及大腸重量及長(zhǎng)度;并截取十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸組織樣，用于腸道組織形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果顯示，在試驗(yàn)第14 d，試驗(yàn)組粗纖維消化率(P＜0.05)和中性洗滌纖維消化率(P＜0.01)顯著增高，到試驗(yàn)第28 d，試驗(yàn)組和對(duì)照組粗纖維表觀消化率無差異(P＜0.05)，說明高米糠日糧能夠短期內(nèi)促進(jìn)蘇淮豬對(duì)粗纖維的消化，并且經(jīng)過兩周適應(yīng)期，粗纖維消化率恢復(fù)。接著試驗(yàn)第75 d對(duì)

5、蘇淮豬腸道發(fā)育進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)除高米糠日糧組小腸相對(duì)重量以及小腸重量在整個(gè)腸道重量的比重降低(P＜0.05)，大腸重量在整個(gè)腸道重量的比例增加(P＜0.05)外，飼喂高米糠日糧對(duì)蘇淮豬胃腸道重量和長(zhǎng)度的其余指標(biāo)均沒有顯著影響，說明高米糠日糧對(duì)蘇淮豬腸道重量和長(zhǎng)度的發(fā)育影響不大。腸道形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，米糠試驗(yàn)組的十二指腸(P＜0.01)和空腸(P＜0.05)絨毛高度均顯著增加，對(duì)四段腸的其他指標(biāo)沒有顯著影響，說明高米糠日糧可

6、以改善腸道上皮微絨毛結(jié)構(gòu)。
　　2蘇淮豬適應(yīng)高米糠日糧的纖維分解菌及其代謝產(chǎn)物特性
　　分別在飼養(yǎng)期第0d、14d、28 d和屠宰前（第75 d），體外收集糞便樣品，用于纖維分解菌數(shù)量測(cè)定以及羧甲基纖維素酶(Carboxymethyl cellulase，CMCase)活性檢測(cè);在屠宰后，分別收集盲腸、結(jié)腸及直腸內(nèi)容物樣品，測(cè)定VFA含量。通過熒光定量PCR對(duì)蘇淮豬糞便纖維分解菌進(jìn)行定量分析結(jié)果表明，在試驗(yàn)第14 d，高米糠

7、日糧組的黃化瘤胃球菌數(shù)量顯著升高(P＜0.05)，之后在28 d和75 d，試驗(yàn)組與對(duì)照組之間黃化瘤胃球菌數(shù)量沒有顯著差異;柔嫩梭菌數(shù)量在試驗(yàn)第14 d及28 d均沒有變化，直至在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，試驗(yàn)組數(shù)量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);而在整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，試驗(yàn)組白化瘤胃球菌數(shù)量一直沒有顯著變化，說明高米糠日糧可以刺激蘇淮豬腸道纖維分解菌增加。通過DNS法測(cè)定蘇淮豬糞便CMCase活性結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在試驗(yàn)第14 d，試驗(yàn)組的CMCase活性極顯著

8、高于對(duì)照組(P＜0.01)，隨后在試驗(yàn)第28 d及試驗(yàn)第75 d，與對(duì)照組無差異，說明高米糠日糧在第14d引起蘇淮豬CMCase活性增加，而食糜羧甲基纖維素酶活性，可以間接反應(yīng)纖維分解菌活力，間接說明其纖維分解微生物活性增加。最后，測(cè)定盲腸、結(jié)腸和直腸揮發(fā)性脂肪酸(VFA)含量發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組日糧相比，高米糠日糧顯著提高了蘇淮豬盲腸內(nèi)容物中乙酸/丙酸比值(P＜0.05);顯著增加結(jié)腸中丙酸濃度(P＜0.05)以及乙酸/丙酸比值(P＜0.0

9、1)、增加乙酸/丁酸比值(P＜0.05);還顯著降低了直腸異丁酸、異戊酸以及支鏈脂肪酸濃度(P＜0.01)，說明米糠替代部分玉米對(duì)蘇淮豬大腸VFA的產(chǎn)量有影響，且不同VFA指標(biāo)在不同腸段內(nèi)變化情況不同。
　　3高米糠日糧對(duì)蘇淮豬腸道免疫健康的影響
　　分別在飼養(yǎng)期第0d、14d、28 d和屠宰前（第75 d），體外收集糞便樣品，測(cè)定雙歧桿菌、乳酸桿菌和大腸桿菌的數(shù)量;屠宰時(shí)，測(cè)定胃、各段小腸和大腸pH值;采集十二指腸、空腸、

10、回腸、盲腸和結(jié)腸各腸段黏膜，測(cè)定黏膜中白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量;利用小腸組織樣，測(cè)定腸道杯狀細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果顯示，在試驗(yàn)第28 d，高米糠日糧組雙歧桿菌、乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量與對(duì)照組相比均顯著增加(P＜0.05)，到試驗(yàn)期結(jié)束，三種菌數(shù)量與對(duì)照組水平無差異，暗示飼喂米糠纖維帶來的蘇淮豬腸道內(nèi)乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌的改變具有彈性和瞬時(shí)性。在試驗(yàn)結(jié)束，高米糠日糧組胃腸道p

11、H均無顯著變化;而除十二指腸杯狀細(xì)胞數(shù)量極顯著增加(P＜0.01)外，其余腸段杯狀細(xì)胞數(shù)量均無顯著變化;飼喂高米糠日糧對(duì)各腸段促炎性細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的表達(dá)量均沒有影響。以上結(jié)果說明米糠替代部分玉米形成的高纖維日糧對(duì)蘇淮豬腸道免疫健康起到一定積極作用，且具有時(shí)效性。
　　綜上，利用米糠替代部分玉米的高纖維日糧飼喂蘇淮豬，對(duì)其腸道發(fā)育有一定促進(jìn)作用，并且可以通過調(diào)控纖維分解菌豐度和纖維分解酶活性高效消化利用