造血干細胞移植治療腦梗死的實驗研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文造血干細胞移植治療腦梗死的實驗研究姓名：馬洪穎申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：李永秋20080301中文摘要造血干細胞移植治療腦梗死的實驗研究摘要目的：缺血性腦血管病是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，具有較高的致殘率和致死率。除了超早期的溶栓治療和康復外沒有任何治療措施能夠證明對患者有益。因此，腦缺血患者受損神經(jīng)功能的修復成為研究的重點。目前認為最有前景的方法是細胞替代治療。造血干細胞(hematopoieti

2、cstemcells，HSCs)可塑性使臨床HSCs移植治療腦梗死成為可能。本研究通過觀察移植細胞存活、遷移、分化情況，以及移植前后神經(jīng)功能缺損評分、梗死體積的變化，驗證HSCs能否分化為神經(jīng)干細胞、神經(jīng)細胞以及血管內(nèi)皮細胞，重建神經(jīng)環(huán)路及微循環(huán)。并探討神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactorNGF)對移植HSCs的存活、分化以及神經(jīng)功能改善的影響。同時比較HSCs內(nèi)源性動員和外源性移植的治療效果，尋找腦梗死治療更有效方法。方法

3、l通過皮下注射重組人粒細胞集落刺激因子(rhGCSF)束U激骨髓干細胞入血，經(jīng)密度梯度離心方法分離HSCs。細胞免疫組化檢測HSCs表面特異性抗原CD34。利用(5一溴脫氧尿嘧啶)Brdu進行細胞標記。選取280～3209雄性SD大鼠，根據(jù)改良后的Longa線栓法建立大鼠大腦中動脈腦栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，模型制作成功后7天，隨機分為五組：HSCs組(A組)、HSCsNGF組(B