表皮生長(zhǎng)因子及其受體在胎兒生長(zhǎng)受限時(shí)的表達(dá)及川芎嗪的作用.pdf

1、目的：研究胎兒生長(zhǎng)受限(FGR)時(shí)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)及其受體(EGFR)的表達(dá)變化，并探討川芎嗪注射液對(duì)FGR的干預(yù)作用。 材料與方法：成年無交配史Waister雌鼠24只，體重220-300g，山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，所用香煙為市售香煙，煙堿含量1.1mg/只，焦油含量15mg；酒為市售白酒，酒精度45％。川芎嗪注射液由北京永康藥業(yè)有限公司提供。雌雄按1：1隨機(jī)于前一晚合籠，次日晨，取雌鼠陰道分泌物涂片鏡檢，檢出精子

2、者確定為妊娠0日。按妊娠先后順序隨機(jī)分為三組：正常組、FGR模型組、川芎嗪注射液治療組。為了清除同窩胎數(shù)對(duì)胎鼠體重的影響，分娩胎數(shù)少于6只或大于14只的孕鼠予以剔除。室溫20℃，安靜環(huán)境下分籠飼養(yǎng)。模型組、治療組自妊娠7日起，每日置于煙氣環(huán)境中3次，每次15min，燃煙1支；每日白酒9ml(kg．d)灌胃。正常組同時(shí)間置于密閉環(huán)境中，并予等量生理鹽水灌胃。治療組自妊娠13日起每日腹腔注射川芎嗪注射液8mg(kg．d)，連用7日。正常及模

3、型組同期腹腔注射等量生理鹽水。于孕20日行剖宮術(shù)，術(shù)前取孕鼠母血清5ml，術(shù)中取臍靜脈血5ml，離心分離血清，均取上清液-20℃保存?zhèn)錂z。EGF測(cè)定采用放射免疫分析法，試劑由天津九鼎生物工程工司提供。于孕20日行剖宮取胎術(shù)，逐一取出胎鼠，擦凈羊水并稱重。記錄鼻臀長(zhǎng)度時(shí)，將胎鼠置于直尺上，使其鼻尖、頂部、尾跟部均位于一直線，其鼻尖到尾根部的距離為鼻臀長(zhǎng)度。胎仔重量系數(shù)(poundera．index，PI)=胎仔重量(g)．100/胎仔身長(zhǎng)

4、(cm)。分別取胎盤、胎膜10％福爾馬林固定24小時(shí)，隨后脫水、包埋制作蠟塊片，待檢。采用免疫組化法，兔抗鼠EGF及EGFR多克隆抗體、SABC試劑盒由武漢博士得供應(yīng)。結(jié)果判定：細(xì)胞膜、細(xì)胞漿呈棕黃著色為陽性反應(yīng)；細(xì)胞無棕黃著色為陰性反應(yīng)。以BZ-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)多組織切片進(jìn)行圖像分析。同一組織在高倍鏡下分別取10個(gè)不同視野行平均灰度測(cè)定。 結(jié)果: 1．川芎嗪對(duì)煙酒所致胎仔生長(zhǎng)受限的影響各組胎鼠數(shù)、體重、鼻臀長(zhǎng)度

5、、體重系數(shù)生長(zhǎng)參數(shù)的比較：模型組與正常組比較，*p<0.05：川芎嗪注射組與模型組比較， **p<0.05． 2.3組母血、臍血中EGF濃度的比較模型組母血臍、血中EGF濃度與正常組比較差異有顯著性(P<0.05)。川芎嗪注射液組與正常組母血中EGF濃度比較差異無顯著性(p>0.2)． 3.EGF在胎盤和胎膜的表達(dá)光鏡下胎盤和胎膜均見免疫反應(yīng)陽性。免疫陽性物質(zhì)大多位于胞漿及胞膜。胎盤陽性細(xì)胞主要位于基底層及迷路區(qū)滋養(yǎng)細(xì)胞

6、，毛細(xì)血管內(nèi)皮也有表達(dá)。模型組表達(dá)的灰度及面積大正常組(p<0.05)。川芎嗪注射組與模型組比較差異明顯(p<0.05)。 4． EGFR在胎盤和胎膜的表達(dá)EGFR在模型組胎盤的表達(dá)強(qiáng)于正常組(p<0.05)。川芎嗪注射液組與模型組比較，川芎嗪治療效果明顯(p<0.05)。 結(jié)論: 1．煙酒造模是研究FGR的理想方法。 2．EGF水平及其受體與FGR發(fā)病有關(guān)，川芎嗪注射液可能直接或間接促進(jìn)EGF的合成和分泌，促進(jìn)