5-HT-,2A-、5-HT-,7-受體和甘丙肽在大鼠脊髓Onuf核分布的研究.pdf

1、目的：研究5-HT2A、5-HT7受體和甘丙肽(GAL)在雄性大鼠脊髓Onuf核不同運動神經(jīng)元內分布及其與泌尿生殖反射中樞調控的關系。 方法：成年SD大鼠24只(雄性22只、雌性2只)，隨機分為性別對照組(n=6，雄性4只，雌性2只)、HRP組(n=6)和PRV(n=12)組。性別對照組取脊髓L5-6節(jié)段，切片后分別作5-HT2A、5-HT7受體和GAL免疫組化染色；HRP組用HRP分別注入右側尿道外括約肌(HRP-EUS組；n

2、=3)或右側坐骨海綿體肌(HRP-IC組；n=3)，24h后取L5-6節(jié)段，切片后經(jīng)TMB法染色，再結合5-HT2A或5-HT7受體免疫組化染色，光鏡和電鏡下觀察5-HT2A、5-HT7受體在Onuf核的分布情況。PRV組用重組偽狂犬病毒株(PRV-152)分別注入右側尿道外括約肌(PRV-EUS組；n=6)或右側坐骨海綿體肌(PRV-IC組：n=6)，4d后取L5-6節(jié)段，切片后分別作5-HT2A或5-HT7受體或GAL雙標記熒光免疫

3、組化染色。熒光顯微鏡或者激光共聚焦顯微鏡下觀察5-HT2A、5-HT7受體和GAL在Onuf核的分布情況。 結果：性別對照組見雄性大鼠5-HT2A、5-HT7受體和GAL在Onuf核的免疫表達明顯強于雌性大鼠；5-HT2A受體的免疫產物主要位于Onuf核背外側核(DLN)的內側，5-HT7受體則主要位于DLN的外側，GAL在DLN內、外側均有明顯的免疫反應活性表達。HRP-IC組顯示過氧化物酶標記的運動神經(jīng)元位于同側DLN的內側

4、，在相同區(qū)域有5-HT2A受體免疫活性表達；HRP-EUS組見HRP逆行示蹤標記的EUS運動神經(jīng)元位于同側DLN的外側， 5-HT7受體免疫反應活性與HRP標記的運動神經(jīng)元重疊。電鏡下可見DLN運動神經(jīng)元內HRP酶反應產物呈針狀結晶，大多數(shù)5-HT2A受體的免疫標記主要位于IC運動神經(jīng)元細質膜，其周圍樹突質膜上也可查見受體分布。而5-HT7受體免疫產物主要分布在EUS運動神經(jīng)元胞漿內線粒體、內質網(wǎng)和Golgi復合體內。PRV組見PRV-

5、152經(jīng)IC逆行示蹤標記的運動神經(jīng)元主要位于同側DLN的背內側，經(jīng)EUS逆行示蹤標記的運動神經(jīng)元位于同側DLN的腹外側；免疫熒光雙標記顯示5-HT2A受體的免疫標記主要分布于支配IC的運動神經(jīng)元胞體和突起周圍，5-HT7受體主要位于支配EUS的運動神經(jīng)元內，GAL的免疫標記位于EUS和IC的運動神經(jīng)元內。 結論： 5-HT2A、5-HT7受體不均勻分布在Onuf核支配不同的盆底橫紋肌的運動神經(jīng)元；5-HT2A受體主要分布于支配I