抑郁癥大鼠額葉皮層5-HT-,2A-R和SERT基因表達(dá)與西酞普蘭作用機(jī)制的研究.pdf

1、抑郁癥是比較常見的情感性精神障礙,隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、人們生活節(jié)奏的加快、工作壓力的加大,其發(fā)病率在逐年上升.抑郁癥不但使患者的生活質(zhì)量大大降低,也為家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān).揭示抑郁癥的發(fā)病機(jī)制從而發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重大課題.大量資料提示腦內(nèi)5-羥色胺(5-HT)遞質(zhì)功能異?？赡芘c抑郁癥的發(fā)病有關(guān),而能夠干預(yù)腦內(nèi)5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)的藥物如西酞普蘭(Citalopram)有顯著的抗抑郁作用.既往的研究從致病基-因

2、的角度探討了5-羥色胺2A受體(5-HT<,2A>R)和5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(SERT)基因結(jié)構(gòu)多態(tài)性與抑郁癥的關(guān)系,對(duì)5-HT<,2A>R、SERT的表達(dá)與功能的改變與抑郁癥和抗抑郁治療的關(guān)系仍不清楚,因此本研究在抑郁癥動(dòng)物模型考察了5-HT2AR和SERT基因表達(dá)水平的變化,探討了西酞普蘭對(duì)SERT功能的影響. 本研究用慢性中等強(qiáng)度不可預(yù)知應(yīng)激刺激(chronic unpredictablemild stress，CUMS)的方

3、法在SD大鼠上建立了抑郁癥動(dòng)物模型，與對(duì)照組大鼠相比，抑郁癥組表現(xiàn)出水平、垂直活動(dòng)及24小時(shí)糖水消耗量減少，而西酞普蘭則可以部分逆轉(zhuǎn)這些征狀。采用SYB Green I熒光定量PCR的方法檢測(cè)了各組動(dòng)物左額葉皮層腦組織內(nèi)5-HT<'2A> R和和SERT基因表達(dá)水平的變化： 1)與對(duì)照組比較，抑郁癥組大鼠額葉腦組織內(nèi)5-HT<,2A>R基因表達(dá)水平降低(P=0.001)；西酞普蘭組與對(duì)照組相比較，5-HT<,2A>R基因表達(dá)水平

4、無(wú)顯著性差異(P=0.348)，與抑郁癥組相比顯著升高(P=0.014)； 2)在雄性動(dòng)物中，抑郁癥組和西酞普蘭組動(dòng)物腦組織內(nèi)5-HT<,2A>R基因表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組(P值分別為0.024和0.001)；在抑郁癥組和西酞普蘭組動(dòng)物之間該基因的表達(dá)水平無(wú)顯著差異(P=0.573)。雌性動(dòng)物中，抑郁癥組動(dòng)物腦組織5-HT<,2A>R基因表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，(P=0.002)；而西酞普蘭組與對(duì)照組相比較5-HT<,2A>R基

5、因表達(dá)水平無(wú)顯著性差異(P=0.839)，但顯著高于抑郁癥組(P=0.002)； 3)對(duì)照組、抑郁癥組和西酞普蘭組大鼠腦組織SERT基因的表達(dá)水平之間無(wú)顯著性差異；進(jìn)一步分析了雄性/雌性動(dòng)物SERT基因的表達(dá)情況：在雄性動(dòng)物中，對(duì)照組、抑郁癥組和西酞普蘭組大鼠腦組織SERT基因表達(dá)水平無(wú)顯著性差異(抑郁癥組vs對(duì)照組，P=0.076；西酞普蘭組vs對(duì)照組，P=0.092；抑西酞普蘭組vs抑郁癥組，P=0.779)。在雌性動(dòng)物中，

6、抑郁癥組和西酞普蘭組動(dòng)物均明顯低于對(duì)照組(抑郁癥組vs對(duì)照組，P=0.039；西酞普蘭組vs對(duì)照組，P=0.045)，但西酞普蘭組和抑郁癥組SERT基因表達(dá)無(wú)顯著性差別(P=0.690)。 上述結(jié)果表明，在慢性中等強(qiáng)度應(yīng)激刺激下，大鼠左額葉腦區(qū)5-HT<,2A>R基因表達(dá)減弱，而SERT基因表達(dá)無(wú)明顯變化；抗抑郁藥西酞普蘭能提高實(shí)驗(yàn)性抑郁癥動(dòng)物腦內(nèi)5-HT<,2A>R基因表達(dá)水平，這種效應(yīng)具有性別依賴性，在雌性動(dòng)物中更加顯著；西

7、酞普蘭對(duì)SERT基因的表達(dá)無(wú)影響。 西酞普蘭是臨床上常用的新型抗抑郁藥物，其藥理作用與抑制5-HT的重?cái)z取有關(guān)。既然西酞普蘭不影響5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體SERT基因的表達(dá)，那么它是否能抑制SERT的功能呢?因此，本研究在非洲爪蟾卵母細(xì)胞上建立了人類SERT基因的異體表達(dá)系統(tǒng)，應(yīng)用雙微電極電壓鉗技術(shù)記錄5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)電流，觀察了西酞普蘭對(duì)SER"r功能的影響。本研究發(fā)現(xiàn)： 1) 將表達(dá)hSERT 的非洲爪蟾卵母細(xì)胞膜電位鉗制在-60

8、 mV，用含有10μM 5-HT 的任氏液灌流細(xì)胞，可記錄到40-100 nA的內(nèi)向5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)電流。 2) 西酞普蘭對(duì)5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)電流具有阻斷作用，這種阻斷作用具有濃度依賴性(IC50=1.008μM)和長(zhǎng)時(shí)程效應(yīng)。 3)細(xì)胞內(nèi)顯微注射Cgmp對(duì)5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)電流有顯著的抑制作用。 這些結(jié)果證實(shí)西酞普蘭能抑制人類SERT對(duì)5-HT的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，結(jié)合前一部分的結(jié)果，本研究認(rèn)為，抑郁癥可能與腦內(nèi)5-HT，<,2>AR基