雞脾臟中T淋巴細(xì)胞發(fā)育及其免疫功能發(fā)生的研究.pdf

1、本研究分別選擇了13、15、18、20日雞胚及1、7、14、21、35、56日齡雛雞，每個(gè)時(shí)期取5只雞的脾臟，制作冰凍切片，分別進(jìn)行HE染色和免疫組化染色；同時(shí)在上述胚胎20同以后的各時(shí)期另取5只雞胚或雛雞的脾臟，分離淋巴細(xì)胞，進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。 利用HE染色方法觀察雞不同生長(zhǎng)發(fā)育階段脾臟的組織結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明：脾臟實(shí)質(zhì)內(nèi)的白髓與紅髓在胚胎18日以后能辨認(rèn)出來(lái)，4日齡雛雞脾臟中形成明顯可辨的動(dòng)脈周圍淋巴鞘，14日齡時(shí)才觀察到脾

2、小體。隨著日齡的增長(zhǎng)，脾臟的這些特征結(jié)構(gòu)不斷發(fā)育成熟：21日齡時(shí)，白髓和紅髓的分界和比例達(dá)到穩(wěn)定，此后脾小體繼續(xù)變大，而且數(shù)目增多，35日齡和56日齡更為明顯。 利用免疫組織化學(xué)方法結(jié)合計(jì)算機(jī)圖象分析技術(shù)研究不同生長(zhǎng)發(fā)育階段T淋巴細(xì)胞及其亞群在脾臟中的發(fā)育過(guò)程，結(jié)果表明，CD3<'+>T淋巴細(xì)胞從胚胎18日齡開(kāi)始個(gè)別地出現(xiàn)在脾臟中，主要分布在動(dòng)脈周圍淋巴鞘和紅髓中。隨著日齡的增長(zhǎng)，CD3陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量整體呈上升趨勢(shì)，在21日齡時(shí)

3、達(dá)到穩(wěn)定。在4日齡前，CD3陽(yáng)性細(xì)胞表面CD3分子蛋白表達(dá)量較少，說(shuō)明4日齡前脾臟中的CD3<'+>T淋巴細(xì)胞還未成熟。CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)間不同，CD8<'+>細(xì)胞出現(xiàn)較早，而且數(shù)量始終多于CD4<'+>細(xì)胞。隨著日齡增長(zhǎng)，二者數(shù)量整體呈上升趨勢(shì)，都在21日齡時(shí)達(dá)到峰值，顯著高于此前各日齡(P<0.05)。CD4<'+>和CD8<'+>細(xì)胞表面陽(yáng)性分子蛋白表達(dá)量都在7日齡時(shí)達(dá)到穩(wěn)定，說(shuō)明7日齡脾臟中的CD4<'+

4、>和CD8<'+>T淋巴細(xì)胞達(dá)到成熟水平。CD4<'+>細(xì)胞主要分布在動(dòng)脈周圍淋巴鞘中，而且脾小體中也存在CD4<'+>細(xì)胞，紅髓中直到21日齡才明顯觀察到CD4<'+>細(xì)胞；CD8<'+>細(xì)胞在動(dòng)脈周圍淋巴鞘中和紅髓中都有大量分布，但是脾小體中沒(méi)有CD8<'+>細(xì)胞分布。CD4<'+>/CD8<'+>的比值基本維持在0.3-0.5之間。 不同時(shí)期雞脾臟淋巴細(xì)胞進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：雞從4日齡起，脾臟中的T淋巴細(xì)胞開(kāi)始

5、具備與刀豆蛋白(ConA)進(jìn)行反應(yīng)并發(fā)生增殖的功能，同時(shí)發(fā)現(xiàn)4-7日齡脾臟淋巴細(xì)胞有很高的自身增殖活性。不同時(shí)期脾臟T淋巴細(xì)胞的ConA刺激指數(shù)總體呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明脾臟中T淋巴細(xì)胞的細(xì)胞免疫功能隨著年齡的增長(zhǎng)而增強(qiáng)。 研究發(fā)現(xiàn)：脾臟組織結(jié)構(gòu)發(fā)育、T淋巴細(xì)胞發(fā)育和T淋巴細(xì)胞免疫功能發(fā)生三者之間存在密切的關(guān)系，T淋巴細(xì)胞的遷入會(huì)充實(shí)脾臟的組織結(jié)構(gòu)如動(dòng)脈周圍淋巴鞘；脾臟的特殊組織結(jié)構(gòu)又會(huì)為淋巴細(xì)胞行使功能活動(dòng)提供場(chǎng)所；同樣T淋巴細(xì)胞執(zhí)