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1、目的:對(duì)于缺血性腦卒中急性期的治療,溶栓治療是目前公認(rèn)最有前景的治療方法,但同時(shí)帶來(lái)的再灌注損傷限制了其在臨床上的應(yīng)用。再灌注損傷是一個(gè)多環(huán)節(jié)、多級(jí)聯(lián)的病理生理過(guò)程,因?yàn)橹兴帍?fù)方存在化學(xué)成分多樣性及生物活性廣泛性的特性,從而為阻斷腦缺血再灌注損傷發(fā)生、發(fā)展的多途徑、多水平損害提供了理論上的可能性。丹星通絡(luò)湯是我科治療缺血性中風(fēng)的經(jīng)驗(yàn)方,方由丹參、膽南星力主,活血通絡(luò),清熱化痰,有效清除瘀阻于腦絡(luò)的痰濁和瘀血;另槐花、三七、川芎、紅花、大
2、黃活血化瘀,另外配伍黃芩、黃芪、元參等清熱燥濕化痰、益氣固表、滋陰清熱藥物。諸藥合用,標(biāo)本兼治,故可以收到治療中風(fēng)病良效。有大量臨床研究表明,以丹星通絡(luò)湯化裁治療缺血性腦卒中有確切療效,故本研究通過(guò)觀察丹星通絡(luò)湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)細(xì)胞Caspase-3蛋白及HSP70蛋白表達(dá)的影響,探討其神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)可為開(kāi)發(fā)有效的神經(jīng)保護(hù)劑提供科學(xué)依據(jù),從而擴(kuò)大溶栓治療的臨床應(yīng)用。 方法:40只健康雄性Wistar大鼠,采用
3、大腦中動(dòng)脈線栓法建立局灶腦缺血再灌注大鼠模型,并隨機(jī)將大鼠分為假手術(shù)組(A組)、缺血再灌注組(B組)、尼莫地平組(C組)丹星通絡(luò)湯小劑量(D組),丹星通絡(luò)湯大劑量組(E組),每組8只。丹星通絡(luò)湯組分別按15g/kg(大劑量),7.5g/kg(小劑量),尼莫地平組10g/kg,術(shù)前連續(xù)灌胃給藥7d,每天一次。假手術(shù)組和缺血再灌組分別灌以7.5g/kg的生理鹽水。大鼠局灶性腦缺血2 h,然后進(jìn)行再灌注。在再灌注24 h斷頭取腦組織,采用免疫
4、組織化學(xué)法檢測(cè)腦組織中Caspase-3蛋白及HSP70蛋白的表達(dá),并與病理組織學(xué)改變進(jìn)行對(duì)照。 結(jié)果:1.利用HE快速常規(guī)染色技術(shù)對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦組織超薄切片進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察:A組細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常;B組腦組織中均見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊,胞體腫脹,尼氏小體減少或消失,出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解,核體不規(guī)則,有明顯軟化灶形成,周邊可見(jiàn)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn);C組D組及E組神經(jīng)細(xì)胞排列略紊亂,仍可見(jiàn)細(xì)胞皺縮和胞核固縮濃染現(xiàn)象,但程
5、度較模型明顯減輕;其中以C、E兩組尤為顯著。 2.腦組織超薄切片免疫組化法觀察HSP70、Caspase-3蛋白的表達(dá)水平: 采用成組設(shè)計(jì)多個(gè)樣本比較的檢驗(yàn)方法,五組大鼠在藥物或替代藥物作用下,發(fā)生腦缺血再灌注后的HSP70、Caspase.3蛋白的表達(dá)均有明顯差異(P<0.01)。即:丹星通絡(luò)湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦組織HSP70蛋白的表達(dá)有上調(diào)作用,對(duì)Caspase-3蛋白表達(dá)均有下調(diào)作用。 結(jié)論:丹星通絡(luò)湯能減輕腦
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