慢性疼痛對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)microRNA表達(dá)的影響.pdf

1、慢性疼痛是全球重大公共衛(wèi)生問(wèn)題之一，常伴有不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)病理改變，而這些主要是由于相應(yīng)基因的表達(dá)水平發(fā)生變化所致。MicroRNA(miRNA)是長(zhǎng)為19～24個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，可調(diào)控基因的表達(dá)。它們與細(xì)胞增殖、分化、凋亡和腫瘤發(fā)生等密切相關(guān)。很多疾病的miRNA表達(dá)譜都已明確，但與慢性疼痛相關(guān)的miRNA表達(dá)譜尚未明確。
　　 目的：
　　 本研究首次應(yīng)用miRNA芯片篩選慢性神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角差異

2、表達(dá)的miRNA，并預(yù)測(cè)其調(diào)控的靶基因，為進(jìn)一步闡明其在慢性疼痛機(jī)制中的作用打下基礎(chǔ)，也為進(jìn)一步的疼痛治療提供可能的靶點(diǎn)。
　　 方法：
　　 雄性SD大鼠40只隨機(jī)分為5組(n=8):NaIve組、Sham組、CCI組、CFA組與NS組，建立CCI(ChronicConstrictiveInjury)模型和CFA(CompleteFreudAdjuvant)模型。取腰膨大脊髓背角，運(yùn)用miRNA芯片技術(shù)篩選CCI模型差

3、異表達(dá)的miRNAs，再用miRNAs特異的引物進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR驗(yàn)證差異表達(dá)的miRNAs。進(jìn)而用熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR驗(yàn)證CFA模型中相關(guān)miRNAs的表達(dá)水平。利用nuRNA靶基因數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)差異表達(dá)miRNAs可能調(diào)控的靶基因。
　　 結(jié)果：
　　 CCI模型和CFA模型手術(shù)側(cè)后足機(jī)械性痛閾和熱痛敏閾值顯著下降(P<0.05)，表明兩種模型均已成功建立。miRNA芯片結(jié)果顯示，CCI組與Sham組及Na

4、ive組相比，表達(dá)水平上調(diào)的有nuR-99b，表達(dá)水平下調(diào)的有miR-34b、m1R-325-5p、miR-349、miR-674-3p與miR-879。熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR結(jié)果與miRNA芯片結(jié)果基本相符。CFA模型miR99b表達(dá)上調(diào)，nuR-674-3p表達(dá)下調(diào)。分別利用三個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)MIRANDA、TARGETSCAN、PICTAR對(duì)miRNA的靶基因進(jìn)行分析，取其交集進(jìn)行綜合分析。
　　 結(jié)論：
　　 CCI神