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文檔簡介
1、目的:通過整體動物實驗和體外細胞實驗,來評估離子液體(ILs)對小鼠肝臟毒性和抗氧化系統(tǒng)的影響,探討其可能的分子機制。
方法:1)體內實驗:實驗設立3個劑量組(6.18、12.36、24.73 mg·kg-1)和1個空白對照組,考察昆明種小鼠分別染毒7 d和14 d后,小鼠的體重、血清生化指標、肝臟系數(shù)、組織病理學的變化。同時檢測了抗氧化系統(tǒng)酶活性和丙二醛含量的變化。2)體外實驗:采用MTT法分別考察了離子液體(ILs)考察了
2、[C14mim]Br/[C14mim]BF4對L02和HepG2細胞的毒性及EC50值;并采用羅丹明123染料熒光法和Western blot法分別檢測了離子液體對肝細胞線粒體膜電位(MMP)和核轉錄因子Nrf2蛋白表達的影響。
結果:染毒后,小鼠的體重總體呈下降,在8-12天時,體重有回升的趨勢,肝臟系數(shù)呈上升的趨勢。兩種ILs均可使小鼠血清中ALT、AST、DBIL、GLB和γ-GT明顯升高。肝臟SOD、CAT、GSH-P
3、x酶活性下降,MDA含量增加;病理學檢查顯示,染毒組小鼠的肝組織受到損害,出現(xiàn)水腫、氣球樣變性和點狀壞死。體外實驗結果顯示,[C14mim]Br/[C14mim]BF4對兩種肝細胞的EC50在8-28μM之間,且對 L02細胞的毒性更強;ILs染毒 HepG2細胞24h后,羅丹明123的熒光強度隨著ILs濃度的增加而下降, MMP發(fā)生了顯著變化;細胞內Nrf2蛋白的表達隨著ILs濃度的增加,在一定范圍內逐漸增強,當濃度過高時,其表達則有
4、下降的趨勢。
結論:[C14mim]Br/[C14mim]BF4可損傷小鼠的肝臟功能,破壞肝臟的抗氧化防御系統(tǒng),造成氧化損傷和脂質過氧化。[C14mim]Br/[C14mim]BF4對L02和HepG2細胞均有較強的毒性,可破壞肝細胞線粒體膜結構的完整性引起MMP變化;并在一定范圍內,可上調HepG2細胞內Nrf2的表達來增強機體的抗氧化能力。[C14mim]Br/[C14mim]BF4對小鼠肝臟的毒性可能是通過Nrf2/AR
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