益氣養(yǎng)陰消癥通絡(luò)中藥對糖尿病腎病大鼠的保護作用以及對血管緊張素(1-7)影響的實驗研究.pdf

1、目的：糖尿病腎?。―N）是糖尿病（DM）腎臟微血管并發(fā)癥，是導(dǎo)致終末期腎?。‥SRD）的主要原因之一，糖尿病患者發(fā)生DN后，其進展至終末期腎功能衰竭的速度大約是其他腎臟疾病的14倍。因此，有效防治DN的發(fā)生和發(fā)展具有重要意義。本研究通過腹腔注射STZ法建立DN大鼠模型，之后應(yīng)用益氣養(yǎng)陰消癓通絡(luò)中藥復(fù)方對該模型進行干預(yù)，通過觀察實驗動物尿蛋白達到“±”水平需要的時間、24小時尿蛋白定量、腎功能、腎臟病理形態(tài)學(xué)變化以及腎組織和血漿中血管緊張

2、素（1-7）、血管緊張素Ⅱ的水平，研究該中藥復(fù)方對DN的治療作用及其可能機制，為其臨床應(yīng)用提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　　 方法：選用清潔級健康雄性SD大鼠46只，體重200±10g，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，代謝籠取尿檢測尿糖和尿蛋白均為陰性，按體重隨機分為正常組10只，模型組、貝那普利組、中藥組各12只。除正常組外，其余各組大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）60 mg/kg，正常組注射相應(yīng)量生理鹽水，72小時后測血糖，以≥1

3、6.7mmol/L為DM模型成模標(biāo)準(zhǔn)。造模各組在DM模型成模后，按血糖水平重新分組，組別與動物數(shù)不變。治療各組在成模后一周開始按成人劑量的20倍給藥，每日一次。中藥組給予益氣養(yǎng)陰消癓通絡(luò)中藥復(fù)方，26.7g/kg·d灌胃，貝那普利組給予貝那普利10mg/kg·d灌胃，正常組和模型組均以相應(yīng)量的生理鹽水灌胃，各組共給藥23周。自DM成模后即日起每日監(jiān)測尿蛋白，以尿中出現(xiàn)蛋白“±”的標(biāo)準(zhǔn)為止，計算蛋白尿產(chǎn)生所需要的天數(shù)，于DM成模后的第18

4、周、24周禁食不禁水留取各組大鼠24小時尿液測定24小時尿蛋白定量；24周末麻醉動物，留取血液標(biāo)本，摘取腎臟稱重計算肥大指數(shù)后，再留取腎臟標(biāo)本。檢測各組大鼠血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平；光鏡、電鏡下觀察腎臟病理形態(tài)學(xué)變化；ELISA法檢測血漿和腎組織中血管緊張素（1-7）的含量、放射免疫法檢測血漿和腎組織中血管緊張素Ⅱ的含量。
　　 結(jié)果：⑴正常組大鼠飲食正常，眼睛有神，反應(yīng)敏捷，肌肉充盈，糞便呈麥粒狀，尿量正常。其

5、余3組注射STZ后，均出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿癥狀，并慢慢出現(xiàn)精神萎靡，反應(yīng)遲鈍，少動抱團。實驗最后一周，與正常組相比，造模各組大鼠明顯體型瘦小，肌肉偏少，上述癥狀以模型組最為顯著。治療期間造模各組均有大鼠死亡情況，其中模型組死亡3只，貝那普利組死亡1只，中藥組死亡1只，死亡原因估計為高血糖引起代謝紊亂最終導(dǎo)致臟器衰竭。⑵模型組、貝那普利組、中藥組大鼠體重比正常組明顯偏輕（P<0.01），而三個造模組各組之間大鼠體重?zé)o顯著性差異（P>

6、0.05）；正常組與造模各組大鼠右腎重?zé)o顯著性差異（P>0.05）；模型組、貝那普利組、中藥組大鼠肥大指數(shù)與正常組相比明顯偏高（P<0.01），而模型組與兩個治療組之間無顯著性差異（P>0.05）。⑶實驗第18周，造模各組24小時尿蛋白定量均明顯高于正常組（P<0.01）；貝那普利組、中藥組與模型組比較明顯偏低（P<0.01）；貝那普利組與中藥組之間無顯著區(qū)別（P>0.05）。實驗第24周模型組、貝那普利組、中藥組與正常組比較均有顯著升

7、高（P<0.01）；貝那普利組、中藥組與模型組比較明顯偏低（P<0.01）；而貝那普利組與中藥組之間仍然無顯著差別（P>0.05）。⑷整個實驗過程中，正常組始終未達到蛋白尿“±”的水平，故只比較造模組的結(jié)果。貝那普利組、中藥組與模型組比較時間明顯延長（P<0.05），而貝那普利組與中藥組之間無顯著差別（P>0.05）。⑸與正常組相比，模型組（P<0.01）、貝那普利組（P<0.05）的血Scr明顯升高，而中藥組與之無明顯差別（P>0.0

8、5）；與模型組比較，貝那普利組和中藥組的血肌酐（Scr）則明顯降低（P<0.01）；而中藥組與貝那普利組之間無顯著性差異（P>0.05）。對于血BUN，造模各組均明顯高于正常組（P<0.01）；貝那普利組和中藥組的BUN較模型組均降低（P<0.01），中藥組與貝那普利組的BUN水平則無明顯差異（P>0.05）。⑹正常組腎小球結(jié)構(gòu)完整，未見腎小球增大，腎小球毛細血管基底膜、系膜、基質(zhì)未見明顯異常改變；模型組可見腎小球增大，腎小球毛細血管基

9、底膜增厚，腎小球系膜細胞增生、系膜基質(zhì)增多，系膜區(qū)增寬；貝那普利組與中藥組也均有不同程度病理改變，但與模型組相比病變較輕。⑺與正常組相比，貝那普利組（P<0.01）、中藥組（P<0.05）大鼠腎組織內(nèi)血管緊張素（1-7）的水平明顯升高，而模型組則明顯降低（P<0.01）；與模型組比較，貝那普利組和中藥組明顯升高（P<0.01）；中藥組腎組織內(nèi)血管緊張素（1-7）的含量則明顯低于貝那普利組（P<0.01）。⑻造模各組大鼠血漿內(nèi)血管緊張素（

10、1-7）的含量明顯高于正常組（P<0.01）；與模型組比較，貝那普利組和中藥組明顯偏低（P<0.01）；中藥組和貝那普利組無明顯差別（P>0.05）。⑼與正常組比較，模型組（P<0.01）、貝那普利組（P<0.05）、中藥組（P<0.05）各組大鼠腎組織內(nèi)血管緊張素Ⅱ的水平明顯升高：貝那普利組和中藥組明顯低于模型組（P<0.01）；中藥組和貝那普利組之間無明顯差別（P>0.05）。⑽與正常組比較，造模各組大鼠血漿中血管緊張素Ⅱ的水平明顯

11、升高（P<0.01）；貝那普利組和中藥組明顯低于模型組（P<0.01）；中藥組血漿血管緊張素Ⅱ的水平明顯低于貝那普利組（P<0.05）。
　　 結(jié)論：①益氣養(yǎng)陰消癓通絡(luò)中藥可以減少DN大鼠的尿蛋白；降低血Scr及血BUN，保護腎功能。②益氣養(yǎng)陰消癓通絡(luò)中藥可以有效抑制DN大鼠的腎小球毛細血管基底膜的增厚、系膜基質(zhì)的增生以及足細胞的融合，延緩腎臟病理學(xué)進展。③益氣養(yǎng)陰消癓通絡(luò)中藥可以改變DN大鼠腎組織以及血漿中血管緊張素（1-7）