血管緊張素(1-7)對糖尿病大鼠肝臟炎癥通路IKKβ-NF-κB的影響.pdf

1、目的：
　　本研究通過建立STZ誘導的糖尿病大鼠模型，探討多肽血管緊張素（1-7）[Ang-(1-7)]對糖尿病大鼠肝臟組織形態(tài)學的影響，以及對關鍵炎癥信號通路IKKβ/NF-κB及炎癥因子的影響，探索Ang-(1-7)對炎癥損傷保護的機制，為治療糖尿病提供新的思路方法。
　　方法：
　　本研究選取健康的雄性Wistar大鼠（體重160-200)g，共34只。適應性喂養(yǎng)1周后，隨機抽取10只作為正常組（NC組），以普通

2、飼料飼養(yǎng)至實驗結束；剩余24只則給予高脂高熱量飼料喂養(yǎng)，8周后，聯(lián)合小劑量STZ（30mg/Kg）一次性腹腔注射，構建糖尿病大鼠模型，NC組則予等體積檸檬酸三鈉緩沖液對照。72小時后尾靜脈采血測FBG，非同日兩次FBG≥16.7mmol/L視為糖尿病大鼠造模成功，造模成功共20只。隨機分2組，糖尿病組（D0組，n=10）和Ang-(1-7)干預組（DA組,n=10）， DA組予Ang-(1-7)（300μg·kg–1·d–1）頸部皮下注

3、射，NC組和D0組等量生理鹽水相同方式給藥。共干預8周。實驗結束后檢測3組大鼠的各項指標，及體重、空腹血糖、肝指數、血清胰島素以及AngⅡ含量，計算HOMA-IR、HOMA-ISI。HE染色比較各組大鼠肝臟病理學變化；免疫組化法檢測肝臟IKKβ、NF-κB蛋白水平；實時熒光定量（RT）PCR檢測肝臟IKKβ、NF-κB、TNF-α、IL-6基因表達程度。
　　結果：
　　與NC組比較，糖尿病組大鼠的體重減輕，空腹血糖、血清A

4、ngⅡ的含量明顯均升高，胰島素水平減少，且都有統(tǒng)計學差異（均P＜0.05）；HOMA-IR增加72.6％、HOMA-ISI減少18.4%（均P<0.05）；病理學顯示：肝臟小葉結構模糊，肝細胞排列紊亂，變性、壞死明顯，并有不同程度點狀或灶狀的炎細胞浸潤，脂肪沉積顯著；肝臟組織中IKKβ、NF-κB蛋白表達水平分別增加1.13倍、1.07倍；IKKβ、NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA水平分別增加3.27、2.96、5.16、5.1

5、9倍，上述差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　經Ang-(1-7)干預后，糖尿病大鼠的空腹血糖、AngⅡ含量顯著減少；胰島素含量升高；HOMA-IR減少15.1%，HOMA-ISI升高4.8%；差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但體重增加無統(tǒng)計學意義。病理學顯示：肝小葉輪廓尚清，肝細胞排列尚規(guī)律，脂肪沉積有所改善，肝細胞變性、壞死及炎性細胞浸潤明顯較少。肝臟組織IKKβ、NF-κB蛋白表達水平分別降低37.09%、32.1

6、7%；IKKβ、NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表達水平分別降低50.53%、35.35%、34.69%，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。但與NC組比較，尚未達到正常組的水平，且差異有統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　1.長期高脂高熱量飲食聯(lián)合STZ誘導的糖尿病大鼠存在RAS過度激活，AngII含量增加，肝臟炎癥通路IKKβ/NF-κB激活，炎癥因子TNF-α、IL-6含量增加，炎癥損傷嚴重。
　　2.糖尿病大