中鏈脂肪酸受體Gpr84基因在斑馬魚(yú)中的時(shí)空表達(dá)及免疫功能研究.pdf

1、游離脂肪酸(free fatty acid,FFA)不僅是動(dòng)物機(jī)體的一種主要的能量提供者還扮演著重要信號(hào)分子的角色。最近研究證明FFA可以作為配體與多種G蛋白偶聯(lián)受體相互作用。已報(bào)道的這類(lèi)G蛋白偶聯(lián)受體有多種,比如Gpr40, Gpr41, Gpr43和Gpr120等,Gpr41和Gpr43主要被短鏈脂肪酸激活,Gpr40的配體是中鏈脂肪酸,Gpr120主要是長(zhǎng)鏈脂肪酸的受體,這些脂肪酸受體不僅參與機(jī)體的脂肪酸代謝,還參與體內(nèi)多種生理功

2、能如細(xì)胞增殖與分化,血糖代謝等。
　　Gpr84是最新發(fā)現(xiàn)的一種G蛋白偶聯(lián)受體,該受體能被碳鏈長(zhǎng)為9–14的中鏈脂肪酸激活。與其他脂肪酸受體不同的是,該脂肪酸受體的作用與免疫調(diào)控相關(guān)聯(lián);但有關(guān)研究主要集中在哺乳動(dòng)物中,還未見(jiàn)魚(yú)類(lèi)Gpr84功能的報(bào)道?；诖?我們選取魚(yú)類(lèi)中的模式生物斑馬魚(yú)為研究對(duì)象,對(duì)該基因的組織分布、胚胎發(fā)育時(shí)期的表達(dá)模式以及在其在免疫調(diào)控中的作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究。
　　通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù),我們發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)

3、Gpr84基因在斑馬魚(yú)的腸、心臟和肝臟中高表達(dá);在胚胎發(fā)育過(guò)程中,該基因在胚胎發(fā)育早期高表達(dá),隨著發(fā)育的進(jìn)行其表達(dá)逐漸降低,呈現(xiàn)母源性表達(dá)的特點(diǎn);到體節(jié)期,Gpr84的表達(dá)又迅速上升,然后隨著發(fā)育的進(jìn)行又逐漸下降;進(jìn)一步的胚胎整體原位雜交顯示,Gpr84 mRNA在卵裂期與囊胚期廣泛表達(dá),在第18 h時(shí)期胚胎后部的信號(hào)出現(xiàn)減弱,在第48 h信號(hào)逐漸集中到特定部位,如:頭部,胸鰭,鰓弧,腸,側(cè)線(xiàn)神經(jīng)簇等。另外,運(yùn)用實(shí)時(shí)定量 PCR技術(shù),發(fā)

4、現(xiàn)饑餓、LPS(lipopolysaccharide)刺激、中鏈脂肪酸十一烷酸(undecanoic acid)誘導(dǎo)均可以上調(diào)Gpr84基因的表達(dá);通過(guò)細(xì)胞脂滴染色實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)Gpr84基因在誘導(dǎo)脂滴形成中發(fā)揮作用;我們還揭示,在斑馬魚(yú)Gpr84的介導(dǎo)下,中鏈脂肪酸十一烷酸可以放大LPS誘導(dǎo)的白細(xì)胞介素12 p40(IL-12 p40)的表達(dá)。我們的實(shí)驗(yàn)表明,斑馬魚(yú)Gpr84在免疫防御中發(fā)揮作用,而且脂肪酸可能通過(guò)Gpr84的介導(dǎo)對(duì)免疫系