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1、易形成G-四聯(lián)體結(jié)構(gòu)的富G核酸序列在生物的重要領(lǐng)域很常見??紤]到這些序列的大部分是和它們的互補(bǔ)鏈共存的,發(fā)展一種可以區(qū)分G-四聯(lián)體和雙鏈結(jié)構(gòu)且判斷雙鏈和G-四聯(lián)體的競爭能力的生物傳感器將會引起很大注意。本論文考察了三苯甲烷類染料(孔雀石綠(MG))和結(jié)晶紫(CV))和G-四聯(lián)體、雙鏈和單鏈DNA的相互作用后熒光和熒光共振能量轉(zhuǎn)移熒光光譜。發(fā)現(xiàn)結(jié)晶紫或孔雀石綠熒光光譜和熒光共振能量轉(zhuǎn)移熒光光譜能很好的區(qū)分四聯(lián)體和雙鏈、單鏈DNA。另外,用
2、G-四聯(lián)體滴定孔雀石綠和結(jié)晶紫能量共振轉(zhuǎn)移熒光可以計算結(jié)晶紫和G-四聯(lián)體的化學(xué)計量比。通過G-四聯(lián)體的互補(bǔ)鏈富C鏈滴定G-四聯(lián)體-結(jié)晶紫配合物的熒光,可以測量計算在互補(bǔ)鏈存在下富G核酸序列的四聯(lián)體結(jié)構(gòu)形成存在的百分?jǐn)?shù)。這個研究提供了一個簡單的區(qū)分G-四聯(lián)體和雙鏈、單鏈DNA和在互補(bǔ)鏈富C-核酸存在下計算G-四聯(lián)體百分?jǐn)?shù)的方法。
此外,本論文還考察了結(jié)晶紫區(qū)分平行和反平行G-四聯(lián)體結(jié)構(gòu)的能力。結(jié)晶紫連結(jié)到反平行G-四聯(lián)體上可
3、以使它的熒光強(qiáng)度增加到一個高水平,因?yàn)镚-四聯(lián)體末端環(huán)(end loops)的存在能夠?qū)Y(jié)合在四聯(lián)體上的CV提供有效的保護(hù)作用,通過阻礙進(jìn)行水分子與CV的接近而使CV的熒光信號顯著增強(qiáng)。在平行G-四聯(lián)體中由于側(cè)環(huán)的存在不能提供這樣的保護(hù),使結(jié)晶紫/G-四聯(lián)體配合物熒光在G-四聯(lián)體形成平行結(jié)構(gòu)時的熒光明顯的比在形成反平行結(jié)構(gòu)時熒光弱。因此結(jié)晶紫可以發(fā)展成一種區(qū)分平行和反平行結(jié)構(gòu)G-四聯(lián)體和檢測G-四聯(lián)體相互轉(zhuǎn)化的結(jié)構(gòu)的靈敏的熒光傳感器,并
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