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文檔簡介
1、由病原菌Avenae avenae subsp.avenae引起的水稻細菌性褐條病隨著近年來暴風(fēng)雨等惡劣天氣的影響,其發(fā)病趨勢越來越嚴重。
本論文通過對病原菌基因組測序、生物信息學(xué)分析,得到12個六型分泌系統(tǒng)vgrG基因。利用分子進化遺傳分析軟件MEGA v.5.0.3對12個vgrG基因序列分析,得到8個核心vgrG基因(vgrG1-8)。分別利用CFSSP、GOR4兩種方法預(yù)測核心vgrG蛋白二級結(jié)構(gòu),最終選出2個vgrG
2、基因(vgrG1-2)進行功能研究。
首先,依據(jù)同源交換原理,通過構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化、篩選表達,實現(xiàn)特定基因的定點突變,構(gòu)建2個突變體菌株△vgrG1、△vgrG2并對其理化特性和致病性研究。結(jié)果表明,vgrG1/vgrG2基因的突變導(dǎo)致細菌的致病性喪失,且抗逆性減弱。其次,利用RT-PCR技術(shù)研究不同培養(yǎng)條件下突變體菌株中六型分泌系統(tǒng)基因的表達變化,結(jié)果顯示:vgrG1-2基因的突變直接導(dǎo)致其他六型分泌系統(tǒng)基因表達異常,且在
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