銅綠假單孢菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控機制的研究.pdf

1、本文對銅綠假單孢菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)調(diào)控機制進行了探討。文章研究了TTSS中的popN基因的功能，發(fā)現(xiàn)popN突變子在不同培養(yǎng)基中TTSS的分泌水平存在著顯著差異，影響對popN基因的功能的判斷。分析了造成表型差異的可能因素，確定蛋白酶對TTSS分泌蛋白的降解作用，是表型差異存在的主要原因，從而首次系統(tǒng)地闡明popN突變子在不同培養(yǎng)基中，都具有TTSS組成型表達的表型，對于深入研究TTSS的調(diào)控機制具有重要意義。本研究采用轉(zhuǎn)座子mariner

2、，構(gòu)建PAO1菌株的轉(zhuǎn)座子文庫，在特定條件下，篩選TTSS表達水平增高的菌落。提取突變子的染色體DNA，用限制性內(nèi)切酶消化后，分別克隆到載體上，然后通過測定序列的方法，分析轉(zhuǎn)座子在染色體上插入的位置。分析51個深藍色菌落，其中3個菌落TTSS的分泌能力明顯高于其它突變子。測序結(jié)果表明，一個突變子轉(zhuǎn)座子插入mexT基因的中間，另外一個插入PA5265基因的C端，位置為1053<'rd>氨基酸，該基因編碼一個未知功能的蛋白，大小為1089a