明膠--透明質(zhì)酸復合納米纖維組織工程支架的構建及其生物學評價.pdf

1、靜電紡絲技術是現(xiàn)階段一種制備數(shù)十到數(shù)百納米纖維的有效方法。由于生物高分子具有良好的生物相容性，近年來國內(nèi)外都對生物高分子的靜電紡絲做了大量的研究。靜電紡生物高分子在組織工程支架、組織修復等方面具有獨特的優(yōu)勢。
　　 本實驗通過靜電紡絲的方法制備明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜，并通過SEM、FTIR、XRD、熱分析、接觸角、力學性能測試分析該納米纖維的各項物理、化學性能。實驗發(fā)現(xiàn)該復合纖維的直徑隨著透明質(zhì)酸在復合體系中的比例的增加而增大

2、；在復合比例相同時，直徑隨著溶液總質(zhì)量體積比的遞增而逐漸增大。隨著透明質(zhì)酸的含量的增加，熱穩(wěn)定性下降，但親水性和力學性能均有所提高。為了提高靜電紡明膠-透明質(zhì)酸纖維的耐水性和穩(wěn)定性，出于對生物毒性的考慮選用碳化二亞胺(EDC)作為交聯(lián)劑，并對交聯(lián)后的明膠-透明質(zhì)酸納米纖維的性能進行了研究，實驗發(fā)現(xiàn)經(jīng)過交聯(lián)的復合纖維，直徑較交聯(lián)前有所增大。交聯(lián)后纖維的脫水溫度、脫水過程的焓變、接觸角和應力都較交聯(lián)前有所提高。通過這些測試，我們對明膠-透明

3、質(zhì)酸復合纖維交聯(lián)前后的物理、化學性質(zhì)有了基本了解，為后續(xù)的細胞實驗和動物實驗奠定了基礎。
　　 通過在共混明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜上種植成纖維、內(nèi)皮細胞，用MTT法檢測細胞的黏附與增殖情況，在體外評價材料的生物相容性。通過H-E染色和SEM來檢測細胞在纖維膜上的生長形態(tài)。黏附實驗表明細胞在材料上能很好的黏附。增殖實驗表明細胞在各種比例的納米纖維材料上的增殖情況都要好于對照組(玻片)，隨著時間的增長，細胞的量明顯增多。H-E染色和

4、SEM結果顯示細胞在纖維膜上能保持良好的細胞形態(tài)。明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜能為細胞提供良好的生長環(huán)境，未表現(xiàn)出細胞毒性。
　　 利用靜電紡明膠-透明質(zhì)酸納米纖維膜作為皮膚敷料植入SD大鼠體內(nèi)，通過外表觀察和H-E染色檢測纖維膜在動物體內(nèi)的生物相容性。實驗結果顯示，纖維膜植入SD大鼠體內(nèi)，和空白對照組具有相似的表面形態(tài)，同時均有巨噬細胞和中性粒細胞產(chǎn)生，一周以后都有大量的毛細血管產(chǎn)生，三周后上皮形成較完整。對傷口面積的測量顯示，兩