兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)腔注射臭氧對滑膜組織的影響.pdf

1、目的：觀察臭氧關(guān)節(jié)腔注射治療后，兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型中滑膜的病理改變及其一氧化氮合酶(NOS)和轉(zhuǎn)化生長因子β（T G F-β）的變化，進(jìn)一步探討臭氧治療骨性關(guān)節(jié)炎的作用。
　　方法：將24只成年新西蘭兔隨機(jī)分為4組，即正常組(A組)、模型組(B組)，假治療組(C組)，臭氧組(D組)，每組6只。A組不做任何處理作為正常對照，B-D組都采用Vandman法將兔的左膝關(guān)節(jié)用石膏固定于伸直位6周，造成兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型后，分別將空氣1ml

2、注入 C組兔的左膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)，40μg/ml臭氧1ml注入D組兔的左膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)，每周一次，連續(xù)兩周。治療結(jié)束后一周處死兔子大體觀察膝關(guān)節(jié)有無關(guān)節(jié)積液、腫脹及滑膜炎表現(xiàn)，測定膝關(guān)節(jié)滑膜厚度，取關(guān)節(jié)滑膜標(biāo)本進(jìn)行HE染色于光鏡下觀察病理變化，免疫組化檢測滑膜組織中一氧化氮合酶和轉(zhuǎn)化生長因子β陽性細(xì)胞的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.大體觀察：正常組：關(guān)節(jié)軟骨外觀呈藍(lán)白色，色澤明亮，無裂紋及軟化，滑膜無明顯增厚，關(guān)節(jié)內(nèi)只有少許清亮滑液。模型組：膝

3、關(guān)節(jié)強(qiáng)直于伸直位，被動活動基本喪失，軟骨表面變得粗糙，并有裂紋、糜爛和潰瘍形成，滑膜充血、水腫，明顯增厚，關(guān)節(jié)積液較多，呈黃色（圖4）。假治療組：軟骨表面粗糙，缺損明顯，滑膜明顯增厚，關(guān)節(jié)積液多，部分渾濁，呈血性積液。臭氧組：關(guān)節(jié)面較光滑，滑膜稍增厚，關(guān)節(jié)積液較少，無混濁血性積液。2.膝關(guān)節(jié)滑膜厚度的測定結(jié)果：各組與正常組比較，膝關(guān)節(jié)滑膜厚度均顯著增高（P<0.01），模型組與假治療組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），臭氧組較假治療組滑

4、膜厚度顯著降低（P<0.05）。3.滑膜組織HE染色光鏡觀察：正常組：滑膜上皮細(xì)胞呈單層、扁平、立方狀分布，未見細(xì)胞增生，滑膜組織結(jié)構(gòu)正常，無組織水腫、變性、壞死，無血管擴(kuò)張充血，無炎性細(xì)胞浸潤、炎性肉芽組織及纖維組織增生等病理性改變（圖5）。模型組：滑膜上皮細(xì)胞中度、重度增生，呈乳突狀、結(jié)節(jié)狀，細(xì)胞層次增多，排列混亂，滑膜組織結(jié)構(gòu)破壞，組織水腫、變性、壞死，伴有血管擴(kuò)張充血，中度、重度炎性細(xì)胞浸潤，炎性肉芽組織及纖維組織增生（圖6）。

5、假治療組：滑膜上皮細(xì)胞中度、重度增生，細(xì)胞層次增多，排列混亂，滑膜組織結(jié)構(gòu)破壞，伴有血管擴(kuò)張充血，中度、重度炎性細(xì)胞浸潤，炎性肉芽組織及纖維組織增生（圖7）。臭氧組：滑膜上皮細(xì)胞輕度、中度增生，細(xì)胞排列稍混亂，滑膜組織結(jié)構(gòu)基本正常，部分仍可見血管擴(kuò)張充血，有輕度、中度炎性細(xì)胞浸潤（圖8）。4.滑膜中一氧化氮合酶(NOS)陽性表達(dá)觀察：正常組：少量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈淺棕黃色、顆粒狀（圖9）。模型組：大量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈深棕黃色（

6、圖10）。假治療組：大量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈深棕黃色（圖11）。臭氧組：較少量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈淺棕黃色（圖12）。平均光密度比較：各組與正常組比較平均光密度均顯著降低（P<0.05），模型組與假治療組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），臭氧組較假治療組平均光密度顯著增高（P<0.05）。（注：所測量之平均光密度實(shí)為透光度，故測量值與免疫組化表達(dá)強(qiáng)度呈反比關(guān)系，即測量值越低免疫組化表達(dá)越強(qiáng)，測量值越高免疫組化表達(dá)越弱。）5.滑膜中轉(zhuǎn)

7、化生長因子β（T G F-β）陽性表達(dá)觀察：正常組：大量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈深棕黃色（圖13）。模型組：少量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈淺棕黃色（圖14）。假治療組：少量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈淺棕黃色（圖15）。臭氧組：較大量表達(dá)于滑膜細(xì)胞胞漿，呈深棕黃色（圖16）。平均光密度比較：各組與正常組比較平均光密度均顯著增高（P<0.05），模型組與假治療組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），臭氧組較假治療組平均光密度顯著降低（P<0.05）。（注