小柴胡湯及其成分的肝毒性體外研究.pdf

1、小柴胡湯在臨床上的肝臟毒副作用近年來受到越來越多的關注,但其致肝損傷的動物體內實驗報道與人體臨床報道的結果并不相符,對于小柴胡湯是否具有肝毒性尚無充足的實驗證據。 本課題首次采用不同配伍組方的階梯式篩選方法,對小柴胡湯復方、配伍減方、單味藥材及其成分作用于體外人肝癌細胞進行毒性的初步篩選,并采用正常人肝細胞進行毒性驗證,以明確小柴胡湯是否具有肝細胞毒性及其毒性來源。結果顯示小柴胡湯水煎液具有肝細胞毒性；小柴胡湯中起主要毒性作用的

2、藥材為黃芩；柴胡本身無毒,但可能與黃芩協(xié)同作用并增強黃芩的毒性；半夏可減輕黃芩和柴胡的毒性作用。人肝癌細胞和正常人肝細胞的細胞活性檢測結果吻合,提示采用人肝癌細胞株進行的肝細胞活性檢測可能為一種良好的肝細胞毒性藥物初步篩選模型,可以對大量的候選藥物進行快速、簡便、可靠的肝細胞毒性篩選。 本課題針對小柴胡湯主要毒性藥材黃芩的兩個主要成分--黃芩苷和漢黃芩素,進行了人肝細胞體外毒性檢測。結果顯示黃芩苷對人肝細胞有一定的毒性,但其毒性

3、貢獻并不足以反映黃芩或小柴胡湯整體的肝細胞毒性,漢黃芩素的各濃度組對肝細胞均無顯著毒性作用。 本課題引進了細胞色素P450還原酶(CPR)組織特異性基因敲除(knockout)小鼠模型,利用此模型的肝微粒體體外孵育實驗,對黃芩苷的代謝酶系進行了初步研究。結果顯示黃芩苷可通過野生型和CPR基因敲除小鼠肝微粒體代謝,由于本實驗中的CPR基因敲除小鼠肝微粒體不具備細胞色素P450的代謝功能,因此說明黃芩苷并不經過肝臟微粒體細胞色素P4