GLP-1對1型糖尿病大鼠心肌脂聯(lián)素及其受體1、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4和單核細(xì)胞趨化蛋白-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　觀察胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）受體激動劑艾塞那肽對1型糖尿病大鼠心肌組織中脂聯(lián)素及其受體1(AdipoR1)、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（GLuT4）、和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）表達(dá)的影響，探討艾塞那肽對1型糖尿病大鼠心肌病變的保護(hù)作用及機制。
　　方法：
　　42只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組（A組，n=7）和糖尿病組(n=35)。采用鏈脲佐菌素（STZ）制備1型糖尿病大鼠模型。將造模成功的29只

2、1型糖尿病大鼠隨機分為糖尿病對照組（B組，n=10）、艾塞那肽低劑量治療組（C組,n=10）和艾塞那肽高劑量治療組（D組，n=9）。C組給予艾塞那肽1μg?kg-1皮下注射，2次/d；D組給予艾塞那肽5μg?kg-1皮下注射，2次/d；A組及B組給予等量生理鹽水皮下注射。干預(yù)治療8周后測定心功能,處死動物。用實時熒光定量PCR方法檢測心肌AdipoR1mRNA、GLuT4mRNA和MCP-1mRNA的表達(dá)。用蛋白質(zhì)印跡（westernb

3、lot）方法檢測心肌脂聯(lián)素受體1、P-AMPK-α/AMPK-α蛋白表達(dá)。用免疫組織化學(xué)染色法檢測AdipoR1在心肌組織中的分布和表達(dá)。用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）檢測心肌脂聯(lián)素及血漿脂聯(lián)素水平。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況：
　　與A組比較，B組糖尿病大鼠空腹血糖、總膽固醇、甘油三酯、游離脂肪酸均明顯升高（P＜0.05），空腹胰島素水平顯著降低（P＜0.05）。艾塞那肽治療后，與B組比較，C組大鼠血糖、總膽固

4、醇、甘油三酯、游離脂肪酸和胰島素?zé)o顯著變化（P＞0.05），D組大鼠總膽固醇、甘油三酯、游離脂肪酸均顯著低于B組（P＜0.05），空腹血糖、空腹胰島素水平無顯著差異（P＞0.05）。
　　2.心重/體重和心功能指標(biāo)
　　與A組比較，B組大鼠體重、全心重明顯降低，心重/體重明顯升高，左室收縮壓（LVSP）、左室內(nèi)壓最大變化速率（±dp/dtmax）均顯著降低，左室舒張末壓（LVEDP）顯著升高。艾塞那肽治療8周后，與B組比較，

5、C組和D組大鼠左室收縮壓（LVSP）、左室內(nèi)壓最大變化速率（±dp/dtmax）均顯著升高，左室舒張末壓（LVEDP）顯著降低（P＜0.05），而體重、全心重和心重/體重?zé)o明顯變化。與C組比較，D組大鼠左室收縮壓（LVSP）顯著升高、左室舒張末壓（LVEDP）顯著降低（P＜0.05），左室內(nèi)壓最大變化速率（±dp/dtmax）無明顯變化（P＞0.05）。
　　3.血漿脂聯(lián)素水平、心肌脂聯(lián)素水平和心肌AdipoR1表達(dá)
　　與

6、A組比較，B組糖尿病大鼠血漿脂聯(lián)素水平顯著減低（P＜0.05），心肌AdipoR1mRNA水平和蛋白表達(dá)顯著增高（P＜0.05）。艾塞那肽治療后，與B組比較，C組、D組大鼠血漿脂聯(lián)素水平顯著升高（P＜0.05），心肌AdipoR1mRNA水平和蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。與C組比較，D組大鼠血漿脂聯(lián)素、AdipoR1mRNA水平和蛋白表達(dá)無明顯變化（P＞0.05）。各組大鼠心肌脂聯(lián)素水平無顯著改變（P＞0.05）。
　　4.

7、心肌GLuT4、P-AMPK-α、MCP-1表達(dá)
　　與A組比較，B組糖尿病大鼠GLuT4mRNA表達(dá)、P-AMPK-α蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05），MCP-1mRNA表達(dá)顯著升高（P＜0.05）。艾塞那肽治療后，C組、D組大鼠GLuT4mRNA表達(dá)、P-AMPK-α蛋白表達(dá)顯著高于B組（P＜0.05），MCP-1mRNA表達(dá)顯著低于B組（P＜0.05）。與C組比較，D組大鼠GLuT4mRNA表達(dá)、P-AMPK-α蛋白表達(dá)、M

8、CP-1mRNA表達(dá)無明顯差別（P＞0.05）。
　　5.各組大鼠心肌組織HE染色形態(tài)學(xué)觀察
　　A組大鼠心肌纖維走行正常，心肌細(xì)胞核居細(xì)胞中央，呈圓形或橢圓形；B組大鼠心肌纖維走行紊亂，部分?jǐn)嗔?，出現(xiàn)局灶性壞死，心肌細(xì)胞有不同程度的變性壞死，細(xì)胞核大小不規(guī)則，心肌間質(zhì)出現(xiàn)炎細(xì)胞浸潤。艾塞那肽治療后，C組、D組大鼠較B組糖尿病大鼠病理改變明顯好轉(zhuǎn)。
　　結(jié)論：
　　1.成功制備1型糖尿病大鼠模型，該模型適用于1型

9、糖尿病及糖尿病心肌病的研究。
　　2.糖尿病大鼠心功能顯著降低，心重/體重增加，心肌脂聯(lián)素水平無明顯變化，血漿脂聯(lián)素水平、心肌GLuT4mRNA表達(dá)、心肌P-AMPK-α蛋白表達(dá)顯著降低，心肌AdipoR1mRNA水平和蛋白表達(dá)、心肌MCP-1mRNA表達(dá)顯著升高。艾塞那肽治療后，心功能改善，而心重/體重、心肌脂聯(lián)素水平無明顯變化。血漿脂聯(lián)素水平、心肌GLuT4mRNA表達(dá)、心肌P-AMPK-α蛋白表達(dá)顯著升高，心肌AdipoR1