菊藤膠囊對應(yīng)激性高血壓大鼠血管內(nèi)皮功能的保護作用.pdf

1、目前心血管疾病，特別是高血壓病的患病率明顯上升，據(jù)我國流行病學(xué)的資料表明，一定強度的應(yīng)激刺激如現(xiàn)代社會快節(jié)奏生活是導(dǎo)致高血壓病的重要原因。高血壓病的病理過程與血管內(nèi)皮功能紊亂密切相關(guān)。因此，保護血管內(nèi)皮功能是防治高血壓及其靶器官損害的關(guān)鍵所在。
　　高血壓以外周血管阻力增高為特征，血管系統(tǒng)既是外周阻力的調(diào)節(jié)器又是高血壓的靶器官。高血壓狀態(tài)下血流切應(yīng)力及血流搏動過程刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管痙攣性收縮引起內(nèi)皮細(xì)胞缺血缺氧以及氧自由基產(chǎn)生

2、增加等等，均引起內(nèi)皮功能損傷，而內(nèi)皮損傷后造成各種血管活性物質(zhì)和生長因子調(diào)控失常，內(nèi)皮素(endothelin,ET)和血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)等血管收縮因子大量釋放，而血管舒張因子主要是一氧化氮(nitrogenmo noxide,NO)的合成釋放不能相應(yīng)增加，甚或減少，導(dǎo)致血管結(jié)構(gòu)和功能的改變。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)特異地作用于血管

3、內(nèi)皮細(xì)胞，在血管內(nèi)皮系統(tǒng)中，VEGF在促進血管形成、維持血管內(nèi)膜的完整性方面具有重要作用。缺血缺氧可誘導(dǎo)VEGFmRNA轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長，刺激細(xì)胞增殖，從而引起細(xì)胞肥大，并參與了動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。
　　高血壓病病機復(fù)雜，我們認(rèn)為本病的病機關(guān)鍵為肝陽上亢。菊藤膠囊（Juteng capsule,JTC）是在此理論指導(dǎo)下完成的，已在臨床應(yīng)用多年，取得較好的臨床效果。
　　本研究的目的是探討菊藤膠囊對應(yīng)激性高血壓

4、（SIH）大鼠血壓的影響及其對血管內(nèi)皮功能的保護作用。采用電擊足底應(yīng)激刺激的方法制備應(yīng)激性高血壓大鼠模型。通過觀察每天應(yīng)激刺激前灌服菊藤膠囊對應(yīng)激大鼠血壓的影響，運用硝酸還原酶法檢測血清一氧化氮（NO）及放射免疫法檢測血漿內(nèi)皮素（ET）的含量，采用反轉(zhuǎn)錄PCR方法檢測主動脈ET-1 mRNA及VEGF mRNA的表達(dá)，觀察主動脈及心臟組織病理結(jié)構(gòu)變化，來闡明菊藤膠囊的降壓效果及對內(nèi)皮功能保護作用的有關(guān)機制，予以客觀的、科學(xué)的論證。

5、>　　本研究的主要實驗方法及結(jié)果如下：
　　1．動物模型的建立：
　　采用電擊足底作為單一應(yīng)激源對大鼠進行應(yīng)激刺激，刺激強度為30-48.5V，頻率0.5HZ。將大鼠放于自制分格式電擊鼠箱，并連接應(yīng)激源。除正常對照組外，其余實驗組大鼠每天上午8：30～10：30、下午2：00～4：00各接受1次應(yīng)激刺激，共4周。分別在施以應(yīng)激刺激前3d及應(yīng)激刺激的第1、2、3、4周的應(yīng)激后2～5h內(nèi)用尾套法測量血壓。
　　2．分組及給

6、藥：
　　42只健康雄性SD大鼠，被隨機分為6組，每組7只，分別對應(yīng)以下處理：A為應(yīng)激+菊藤膠囊高劑量3g/(kg·d)組（JTC-H）；B為應(yīng)激+菊藤膠囊中劑量1.5g/(kg·d)組（JTC-M）；C為應(yīng)激+菊藤膠囊低劑量0.75g/(kg·d)組（JTC-L）；D為應(yīng)激+卡托普利20mg/(kg·d)組（Capropril）；E為應(yīng)激+蒸餾水10ml/(kg·d)組（model）；F為正常對照+蒸餾水10ml/(kg·d)組

7、（control），每天應(yīng)激刺激前食道灌胃，共4周。
　　3．結(jié)果：
　　血壓的改變：應(yīng)激刺激前各組血壓比較無統(tǒng)計學(xué)差異P>0.05，應(yīng)激28天后，應(yīng)激模型組血壓明顯升高，升高程度2.76±0.68kPa，實驗后模型組與其它各組血壓比較均有統(tǒng)計學(xué)差異P<0.01；菊藤膠囊高劑量與中、低劑量組比較均P<0.01，中劑量組與正常組比較P<0.05，低劑量組與正常組比較P<0.01。正常組、西藥對照組、治療高劑量組之間進行比較，無

8、統(tǒng)計學(xué)差異P>0.05。
　　主動脈及心肌組織病理學(xué)特征：正常組大鼠血管內(nèi)皮光滑完整，與正常組比較，模型組及低劑量組大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞核突出于腔內(nèi)，其余各用藥組均有一定程度的抑制作用。
　　ET和NO含量的變化：模型組與正常對照組、西藥組、菊藤高劑量組血清NO含量比較均有較顯著差異（P<0.01）；正常組、西藥組、中藥高中劑量組之間進行比較并無顯著性差異（P>0.05）；中藥高劑量與中、低劑量比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。

9、模型組與正常對照組、西藥組、菊藤高中劑量組血漿ET含量比較均有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.01）；高劑量與中劑量比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）；正常組、西藥組、高劑量組之間進行比較并無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　RT-PCR結(jié)果：在內(nèi)參照β-actin表達(dá)基本一致的情況下，模型組出現(xiàn)特異的ET-1、VEGF基因條帶，而其余各組的基因條帶明顯減弱。
　　本研究采用電擊足底應(yīng)激刺激的方法成功制備了應(yīng)激性高血壓大鼠模型。結(jié)果表明菊