HPLC-FD分析生物樣品中氟乙酸類毒物成分的研究.pdf

1、氟乙酸類藥物包括氟乙酸鈉、氟乙酸和氟乙酰胺，在我國是使用最廣泛的化學類滅鼠藥物之一。由于其無色無味，使其成為容易引起人和動物誤食中毒和被犯罪分子進行投毒犯罪的毒物。因此開展氟乙酸類毒物的分析，特別是生物樣品中痕量氟乙酸類毒藥的分析方法研究是具有重要學術價值和社會效益的研究工作。 針對我國氟乙酸類毒藥分析存在的問題，本論文在廣東省科技計劃項目基金和廣東省公安廳科研基金的資助下，進行了高效液相色譜(HPLC)-熒光檢測(FD)和高效

2、液相色譜(HPLC)-紫外檢測(UV)法測定生物檢材中氟乙酸鈉含量的研究，取得良好的結果。主要內(nèi)容如下： 第一章：綜述了氟乙酸類毒物的理化性質(zhì)和國內(nèi)外有關氟乙酸類毒物的提取、分離及分析測定方法的研究概況，評價了各種方法的優(yōu)缺點和對樣品的適用性。概述了熒光檢測在高效液相色譜中的應用，熒光試劑和熒光衍生的方法。 第二章：研究并建立了以9-氯甲基蒽為熒光衍生化試劑，高效液相色譜一熒光檢測法測定生物檢材中的氟乙酸鈉含量的方法。首

3、次合成并表征了氟乙酸9-亞甲基葸酯衍生物(文獻未見此化合物的報道)，測定了其物理常數(shù)、波譜數(shù)據(jù)及熒光性質(zhì)。較深入地研究和優(yōu)化了生物樣品中氟乙酸鈉的提取、純化、衍生化的方法。結果表明，用反相HPLC-FD測定生物檢材中氟乙酸鈉含量，在所用的色譜分離條件下，目標分析物與反應試劑及其他雜質(zhì)達到完全分離，氟乙酸9一亞甲基葸酯具有強的熒光活性，方法的靈敏度高(檢測限5×10<'-13>g)，重現(xiàn)性好(回收率為82﹪-92﹪)，用于實際樣品的分析，

4、取得令人滿意的效果。 第三章：建立了熒光試劑4-溴甲基-7-甲氧基香豆素(BrMMC)用于生物檢材中氟乙酸鈉的高效液相色譜分析。首次合成了4-氟乙酸-7-甲氧基香豆素甲酯(MMC-MFA)，并進行了物理性質(zhì)，結構表征和光譜性質(zhì)等研究。通過對衍生化條件和色譜分離條件的優(yōu)化，建立了理想的氟乙酸鈉的柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法。結果表明，4-氟乙酸-7-甲氧基香豆素甲酯具有較強的熒光活性，在反相HPLC分析中，可與小分子有機酸(甲

5、酸、乙酸、丙酸等)的衍生物、剩余的衍生化試劑及其水解產(chǎn)物完全分離。方法專屬性強、靈敏度高(檢測限為50 pg)，回收率為81﹪-88﹪，適用于實際檢材樣品的分析。 第四章：研究選用α-溴苯乙酮為氟乙酸鈉的衍生化試劑，合成了α-氟乙酸苯乙酮酯化合物對照品，產(chǎn)物純度高，用UV、<'1>H NMR、<'13>C NMR和EI-MS表征了該衍生物的結構，研究并建立了生物檢材中氟乙酸鈉的提取、衍生化和高效液相色譜紫外檢測方法。結果表明，α

6、-溴苯乙酮和氟乙酸鈉的反應條件較溫和，速度快，是一種理想的柱前衍生化試劑。HPLC分離結果表明，建立的柱前衍生化高效液相色譜紫外檢測方法適用于氟乙酸鈉濃度較高的生物檢材測定。平均回收率為91.33﹪，最低檢出濃度為6×10<'-9>mol·mL<'-1>。 第五章：把建立的熒光柱前衍生化HPLC測定方法擴展到其他有機酸含量的測定，采用高靈敏的熒光試劑9-氯甲基葸(CMA)作為柱前衍生化試劑，在反相高效液相色譜上，實現(xiàn)了6種游離有

7、機酸衍生物的完全基線分離。方法衍生產(chǎn)率高、條件溫和、操作簡便。具有較好的重現(xiàn)性，靈敏度高，對土壤與食品中的游離有機酸實現(xiàn)了快速、準確的測定。 第六章：分別對9-氯甲基葸，4-溴甲基-7-甲氧基香豆素和α-溴苯乙酮三種衍生化試劑用于生物檢材中氟乙酸鈉含量的液相色譜分析方法進行總結，對三種HPLC分析方法的分離條件和檢測結果對比，結果表明，9-氯甲基葸衍生化HPLC檢測具有最高的檢測靈敏度，α-溴苯乙酮法具有較寬的檢測范圍和較好的檢