西南地區(qū)柳杉優(yōu)良無性系組培快繁體系的建立.pdf

1、柳杉是南方地區(qū)主要的用材及園林樹種之一，在木材生產(chǎn)和生態(tài)建設(shè)中發(fā)揮著重要作用。目前生產(chǎn)上使用的幾乎都是實生苗木，良種產(chǎn)量少且不穩(wěn)定，優(yōu)勢未得到充分發(fā)揮，而其無性繁殖技術(shù)尚不成熟，不能滿足大規(guī)模造林的需求。因此，本試驗以無菌條件下萌發(fā)的種子苗以及成年樹莖段為外植體，研究不同基本培養(yǎng)基和植物生長調(diào)節(jié)劑對叢生芽誘導(dǎo)、增殖及生根的影響，建立了完整的組培快繁體系。主要結(jié)果如下:
　　(1)柳杉種子組培快繁體系的建立
　　種子的預(yù)處理為

2、:用0.3％(W/V)KMnO4溶液浸泡2h，再用始溫為45℃的水浸泡24 h，使其吸水膨漲。用0.1％(W/V)洗衣粉水浸泡30 min，流水下沖洗5h。種子的預(yù)處理能增強(qiáng)滅菌效果，并刺激種子萌發(fā)。
　　種子經(jīng)預(yù)處理后，用75％酒精浸泡20 s，再用0.1％HgCl2浸泡10 min的滅菌效果最好，其污染率最低為10.00％，成活率最高可達(dá)82.33％。將滅菌后的種子接種于僅含蔗糖30 g·L-1和瓊脂7 g·L-1的空白培養(yǎng)基

3、上，此時萌發(fā)的幼苗即為無菌種子苗。無菌種子苗誘導(dǎo)叢生芽萌發(fā)的最適培養(yǎng)基為DCR+6-BA0.2 mg·L-1，誘導(dǎo)率最高，為73.33％，其叢生芽萌發(fā)迅速，葉色嫩綠，長勢較好，高生長明顯;叢生芽增殖的最適培養(yǎng)基配方為DCR+6-BA0.2 mg·L-1+IBA0.05 mg·L-1，平均株高達(dá)到5.63 cm，增殖倍數(shù)達(dá)到11.00，且叢生芽生長一致健壯、莖葉生長正常;適宜的生根培養(yǎng)基為DCR+NAA0.01 mg·L-1+IBA0.2

4、 mg·L-1，生根率為90.00％，平均生根數(shù)為4.09，生根質(zhì)量較好，主根數(shù)量較多，長且粗壯并有側(cè)根發(fā)生;試管苗移栽最適宜的基質(zhì)是純河砂，其移栽存活率達(dá)到89％。
　　(2)柳杉莖段組培快繁體系的建立
　　成年樹莖段的預(yù)處理為:將木質(zhì)化新稍假植于大棚，每周噴灑一定量的0.2％(W/V)的多菌靈溶液進(jìn)行滅菌預(yù)處理。將莖段用洗滌劑溶液浸泡30 min，刷去表面灰塵，置于流水下沖洗3h，再用0.2％(W/V)的多菌靈溶液浸泡3

5、0 min。該預(yù)處理可在一定程度上控制外植體的污染。
　　成年樹莖段滅菌的最佳方案為75％酒精滅菌10s、0.1％ HgCl2滅菌6 min，此時污染率較低，為17.33％，成活率最高，為66.67％，滅菌效果最佳。
　　成年樹莖段初代培養(yǎng)的最適培養(yǎng)基配方為WPM+6-BA0.5 mg·L-1+IBA0.3 mg·L-1，其叢生芽的誘導(dǎo)率、平均發(fā)芽數(shù)、平均芽長分別達(dá)到82.67％、4.27個、3.18 cm，其芽苗葉色嫩綠，