趨化因子受體CXCR4對腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移作用的研究.pdf

1、該實驗研究應用免疫組織化學方法證實趨化因子受體CXCR4在伴有肺轉(zhuǎn)移的涎腺腺樣囊性癌原發(fā)灶中明顯陽性,在其它口腔癌的原發(fā)灶也表達增高;淋巴轉(zhuǎn)移灶中趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12有明顯增高表達;同時可見CXCR4和CXCL12在癌組織和癌旁組織中的微血管內(nèi)皮細胞上有陽性表達的現(xiàn)象.應用單抗標記流式細胞儀和Western blot檢測了CXCR4在ACC-M(人涎腺腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細胞株)、ACC-2(人涎腺腺樣囊性癌細胞株)

2、、Tca8113(人舌癌細胞株)細胞上的表達,其中細胞株ACC-M顯著性表達CXCR4受體,陽性率為87.76％;CXCR4的配體CXCL12對ACC-M、ACC-2和Tca8113具有趨化作用,這種趨化效應在ACC-M上表現(xiàn)最為明顯,其次為ACC-2;CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100對CXCL12的趨化作用具有顯著性抑制效應.通過細菌內(nèi)同源重組機制,依據(jù)攜帶CXCR4基因的質(zhì)粒,應用細菌同源重組系統(tǒng):大腸桿菌BJ5183、DH1

3、0B和穿梭質(zhì)粒pShuttle-CMV以及腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1,成功構(gòu)建了能夠進行CXCR4基因轉(zhuǎn)移的重組腺病毒載體pAdCXCR4.應用重組腺病毒載體pAdCXCR4對ACC-2細胞低表達CXCR4單克隆細胞株轉(zhuǎn)染,經(jīng)檢測驗證轉(zhuǎn)染后細胞確實表達有生物活性的受體CXCR4.轉(zhuǎn)染細胞體內(nèi)接種實驗結(jié)果證明,上調(diào)涎腺腺樣囊性癌細胞的CXCR4表達,則導致肺轉(zhuǎn)移的明顯增加.該實驗研究表明趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12在涎