趨化因子受體CXCR4對腺樣囊性癌肺轉移作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗研究應用免疫組織化學方法證實趨化因子受體CXCR4在伴有肺轉移的涎腺腺樣囊性癌原發(fā)灶中明顯陽性,在其它口腔癌的原發(fā)灶也表達增高;淋巴轉移灶中趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12有明顯增高表達;同時可見CXCR4和CXCL12在癌組織和癌旁組織中的微血管內皮細胞上有陽性表達的現(xiàn)象.應用單抗標記流式細胞儀和Western blot檢測了CXCR4在ACC-M(人涎腺腺樣囊性癌肺高轉移細胞株)、ACC-2(人涎腺腺樣囊性癌細胞株)

2、、Tca8113(人舌癌細胞株)細胞上的表達,其中細胞株ACC-M顯著性表達CXCR4受體,陽性率為87.76％;CXCR4的配體CXCL12對ACC-M、ACC-2和Tca8113具有趨化作用,這種趨化效應在ACC-M上表現(xiàn)最為明顯,其次為ACC-2;CXCR4受體激活拮抗劑AMD3100對CXCL12的趨化作用具有顯著性抑制效應.通過細菌內同源重組機制,依據(jù)攜帶CXCR4基因的質粒,應用細菌同源重組系統(tǒng):大腸桿菌BJ5183、DH1

3、0B和穿梭質粒pShuttle-CMV以及腺病毒骨架質粒pAdEasy-1,成功構建了能夠進行CXCR4基因轉移的重組腺病毒載體pAdCXCR4.應用重組腺病毒載體pAdCXCR4對ACC-2細胞低表達CXCR4單克隆細胞株轉染,經檢測驗證轉染后細胞確實表達有生物活性的受體CXCR4.轉染細胞體內接種實驗結果證明,上調涎腺腺樣囊性癌細胞的CXCR4表達,則導致肺轉移的明顯增加.該實驗研究表明趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12在涎

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