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文檔簡介
1、目的:探討趨化因子受體CXCR4小干擾RNA(siRNA)對人喉癌細(xì)胞株(Hep-2細(xì)胞)在裸鼠體形成的移植瘤淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的影響,以尋找人喉癌基因治療的有效途徑。
方法:將與CXCR4 mRNA互補(bǔ)的小干擾RNA(siRNA)通過陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染人喉癌細(xì)胞株Hep-2,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連反應(yīng)(RT-PCR)檢測轉(zhuǎn)染后Hep細(xì)胞CXCR4 mRNA表達(dá)情況。雄性裸小鼠10只,隨機(jī)分成2組,即Hep-2組和siRNA轉(zhuǎn)染組,建
2、立人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后觀察裸鼠的一般情況,每3d用游標(biāo)卡尺測量皮下腫塊大小,按照公式V=1/2ab2計算腫塊體積(a:腫塊長徑,b:腫塊短徑),繪制裸鼠生長曲線,計算腫瘤抑制率。喂養(yǎng)6wK后處死裸鼠,處死裸鼠后測量移植瘤體積并計數(shù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況;采用蘇木精-伊紅染色病理證實移植瘤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,免疫組織化學(xué)SP法檢測各組皮下移植瘤CXCR4蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:人喉癌裸鼠皮下移植瘤模型建立成功后,siRNA
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