vMIP-Ⅱ?qū)?xì)胞表面趨化因子受體CXCR4內(nèi)化及調(diào)變的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、  目的:本室通過(guò)基因重組的方法克隆的vMIP—Ⅱ?qū)儆讦纶吇蜃蛹易?具有廣譜的趨化因子受體結(jié)合活性,可與cXCR4趨化因子受體結(jié)合,因此vMIP—Ⅱ必然影響到CXCR4的生物學(xué)特性。CXCR4主要分布在細(xì)胞表面,本實(shí)驗(yàn)旨在闡明vMIP—Ⅱ?qū)κ荏wCXCR4內(nèi)化的效應(yīng)作用,從而闡明其在抗HIV/AIDS中的作用機(jī)制。
  方法:采用激光共聚焦顯微鏡技術(shù)定性CXCR4的內(nèi)化、流式細(xì)胞儀定量CXCR4的內(nèi)化和熒光分光光度計(jì)連續(xù)動(dòng)態(tài)觀察v

2、MIP—Ⅱ?qū)?xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響。
  結(jié)果:vMIP—Ⅱ能引起細(xì)胞表面受體CXCR4的內(nèi)化,濃度為100ng/ml時(shí),vMIP—Ⅱ在給藥后的最初25分鐘能使細(xì)胞表面受體CXCR4內(nèi)化達(dá)到最大值,內(nèi)化率為75%,且能恒定在這一水平,vMIP—Ⅱ刺激時(shí)間的延長(zhǎng)并不能再增加受體CXCR4的內(nèi)化率。在隨后沒有vMIP—Ⅱ的環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng),內(nèi)化到細(xì)胞內(nèi)的CXCR4并不能再循環(huán)到細(xì)胞表面。vMIP—Ⅱ能誘導(dǎo)的瞬間的高鈣離子內(nèi)流,鈣離子的內(nèi)

3、流速度穩(wěn)定在一較低的水平。在vMIP—Ⅱ與EDTA共培養(yǎng)時(shí),EDTA鏊合掉細(xì)胞外的鈣離子,但我們?nèi)阅軝z測(cè)到細(xì)胞內(nèi)微弱的鈣離子,說(shuō)明vMIP—Ⅱ可以誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)鈣離子庫(kù)中鈣離子的釋放。
  結(jié)論:作為抗HIV/AIDS的新型進(jìn)入抑制劑,vMIP—Ⅱ不僅能引起靶細(xì)胞表面受體CXCR4的內(nèi)化,而且這種內(nèi)化的受體不再循環(huán)到細(xì)胞表面。CXCR4是HIV感染的必備的共受體,vMIP—Ⅱ不僅能和細(xì)胞表面CXCR4結(jié)合,封閉受體,而且還能引起CXC

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