維生素E對二硫化碳致雄性大鼠生殖系統(tǒng)病理結(jié)構(gòu)和凋亡相關(guān)蛋白表達改變的拮抗作用.pdf

1、二硫化碳（Carbon disulfide，CS2）為脂溶性易揮發(fā)液體，作為工業(yè)上廣泛應用的有機溶劑，它能損害生物體多個系統(tǒng)。既往研究已證實長期接觸一定濃度的CS2對雄性生殖系統(tǒng)亦有毒性。研究者發(fā)現(xiàn)CS2暴露人群，睪丸明顯萎縮，生精系列細胞停止成熟，精子數(shù)減少，精子染色體畸變率增高。同時，CS2具有明顯的脂質(zhì)過氧化作用，且這種作用在許多毒性發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的意義。本研究在體內(nèi)實驗的基礎上，利用抗氧化劑維生素E（VE）干預CS2染毒

2、雄性大鼠，觀察CS2致雄性大鼠睪丸、附睪、輸精管、前列腺及精囊腺組織病理結(jié)構(gòu)，凋亡相關(guān)蛋白（p53、Bcl-2、Fas、FasL）表達的改變和VE的拮抗作用，為探討CS2對男（雄）性生殖損傷的某些可能機制提供科學依據(jù)。 30只健康雄性Wistar大鼠隨機分為三組:（1）CS2染毒組（1250mg/m3）：靜式吸入染毒，每天2h，每周5d，共10周；（2）對照組：條件相同吸入空氣；（3）CS2+VE組：VE拌入飼料中（250mg/

3、kg）。染毒結(jié)束后，取大鼠睪丸、附睪、輸精管、前列腺和精囊腺以HE染色、電鏡、Western blot及免疫組化法從不同角度來觀察VE對CS2致雄性大鼠生殖系統(tǒng)病理結(jié)構(gòu)和凋亡相關(guān)蛋白表達改變的拮抗作用。 研究結(jié)果顯示： 1.HE染色。 CS2染毒組大鼠睪丸間質(zhì)水腫，曲細精管生精細胞數(shù)目及層次明顯減少；附睪管上皮細胞排列紊亂，有增生現(xiàn)象，細胞脫落明顯，管腔體積變小，管腔中精子數(shù)量減少；輸精管粘膜上皮扁平，排列整齊，乳突狀突

4、起消失，管腔擴大，管腔中精子數(shù)量減少；前列腺腺泡擴大，管壁變薄，皺褶減少，細胞排列尚正常；精囊腺組織病變不明顯。VE干預組組織病理改變較染毒組減輕。 2.電鏡。CS2染毒組睪丸支持細胞、間質(zhì)細胞及各級生精細胞均出現(xiàn)胞漿空泡，其中精原細胞、初級精母細胞及精子細胞線粒體腫脹，精子尾部縱切面“9*2＋2”軸絲結(jié)構(gòu)紊亂，微管溶解缺失。VE干預組間質(zhì)細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，精原細胞、精母細胞胞漿可見輕度空泡，精母細胞線粒體輕度腫脹。 3.

5、Western blot CS2染毒組大鼠睪丸組織中p53、Bcl-2、Fas蛋白表達均上調(diào)，與對照組比較有統(tǒng)計學差異（P<0.01和P<0.05），VE干預后表達明顯下降，與染毒組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。 4.免疫組化。 CS2染毒組大鼠附睪上皮細胞中p53、Bcl-2及Fas蛋白表達升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），VE干預后表達下降（P<0.01）。但FasL蛋白的表達水平較對照組及VE干預

6、組無明顯變化（P>0.05）。輸精管、前列腺和精囊腺上皮細胞中Fas蛋白表達升高，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），VE干預后表達下降（P<0.01），但p53、Bcl-2及FasL蛋白的表達與對照組及VE干預組比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 從以上結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，CS2吸入染毒可導致大鼠睪丸間質(zhì)水腫，曲細精管內(nèi)生精細胞數(shù)目及層次減少，各級生精細胞、支持細胞及間質(zhì)細胞的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生病理變化，同時可使附睪、輸精