復(fù)方中藥燒傷涂膜的制備及體外經(jīng)皮滲透的研究.pdf

1、中醫(yī)中藥是我國傳統(tǒng)文化的寶貴遺產(chǎn)，復(fù)方中藥燒傷涂膜是由中藥黃芩及虎杖的提取液為原料，加入其他輔料，以殼聚糖為成膜材料制成均勻半透明、黏度適中的涂膜劑。黃芩為唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi.的干燥根，藥理學(xué)研究表明黃芩及其有效成分黃芩苷不但具有抗炎、抗菌、解熱、鎮(zhèn)靜、利尿、利膽、保肝以及調(diào)節(jié)免疫等作用，而且具有良好的抗真菌作用?；⒄葹檗た浦参锘⒄萈olygonumcuspidaturnSieb.et

2、Zucc.的干燥根莖及根，其有效成分具有活血化淤、止痛、收斂的功效；用于燒傷有明顯的止痛消炎、收斂、防腐、促進(jìn)上皮生長、減少燒傷后疤痕增生的特點。 復(fù)方中藥燒傷涂膜采用甲殼素的衍生物殼聚糖為成膜材料，甲殼素廣泛存在于甲殼綱動物如蟹、蝦、昆蟲及真菌中，是一種維持和保護(hù)甲殼動物和微生物軀體的線性氨基多糖，是自然界產(chǎn)量僅次于纖維素的第二大類高分子化合物。殼聚糖是甲殼素脫乙?；漠a(chǎn)物，它具有良好的吸附性、成膜性、通透性、成纖性、吸濕性和

3、保濕性，并具有良好的生物相容性，不與體液、組織和細(xì)胞產(chǎn)生異物反應(yīng)，具有生物可降解性，在生物體內(nèi)可被溶菌酶降解為對人體無毒的N-乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖。不溶血、無刺激性、無熱源性、無致突變性，因而是一種安全可靠的天然生物活性多糖，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域。 1.中藥提取液抑菌作用研究 黃芩和虎杖兩種中藥材分別考察95％乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮和蒸餾水五種提取液對五種菌的抑菌作用，五種菌分別為代表革蘭氏陽性菌的金黃色葡

4、萄球菌，代表革蘭氏陰性菌的大腸埃希菌，代表藥品中常見污染菌的枯草芽孢桿菌，代表酵母菌的白色念珠菌，代表霉菌的黑曲霉。首先應(yīng)用濾紙片法對上述提取液抑菌效力進(jìn)行測定，經(jīng)過比較選擇95％乙醇為中藥材最佳提取溶劑。95％乙醇比三氯甲烷等毒性小，經(jīng)95％乙醇提取后的溶液制成的制劑與蒸餾水提取液相比，不會有沉淀或混濁等現(xiàn)象，適合于制劑生產(chǎn)。其次應(yīng)用固體稀釋法測定各提取液對五種菌的最小抑菌濃度(MIC)，結(jié)果表明：在相同的作用時間內(nèi)，同一種提取液的濃

5、度越高，其抑菌作用越大。對照有大量菌生長，表明各提取液的抑菌效力來自于本身的活性成分。經(jīng)MIC確定黃芩提取液的最小抑菌濃度為20％，虎杖提取液的最小抑菌濃度為25％。 2.復(fù)方中藥燒傷涂膜的制備、質(zhì)量考察及穩(wěn)定性研究 通過正交試驗考察浸泡時間、提取時間、提取液濃度三因素對中藥有效成分得率的影響，結(jié)果表明中藥的最優(yōu)提取條件是應(yīng)用95％的乙醇提取2小時，為使其有效成分提取完全，實際生產(chǎn)中采用95％乙醇提取2次，每次2小時。

6、 制劑的質(zhì)量考察首先是黃芩和虎杖的鑒別，樣品經(jīng)提取制得的供試品溶液，與對照品溶液、對照藥材溶液及陰性對照溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以適宜的展開劑展開，取出晾干后觀察，供試品與對照藥材溶液及對照品溶液色譜在相應(yīng)位置上有相同顏色的斑點，而陰性對照溶液則無，證明中藥成分的存在。其次應(yīng)用反相高效液相梯度洗脫法測定復(fù)方中藥燒傷涂膜中黃芩苷和大黃素的含量，試驗采用LichrospherC18(150mm×4.

7、6mm)柱，以甲醇-0.2％磷酸為流動相，梯度洗脫，檢測波長λ=280nm，流速為1.0ml/min。結(jié)果表明：黃芩苷在0.712～3.00mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.989692，平均加樣回收率為97.74％，RSD為2.37％(n=9)。大黃素在0.212～0.895mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.992528，平均加樣回收率為97.67％，RSD為1.92％(n=9)。結(jié)論：RP-HPLC梯度洗脫法可用于本制劑質(zhì)量

8、控制，操作簡便，結(jié)果可靠，重現(xiàn)性好。 將制劑按上市包裝，通過加速試驗和長期試驗考察制劑的穩(wěn)定性，結(jié)果在考察時間內(nèi)制劑的外觀性狀、鑒別、含量指標(biāo)基本不變。為確保安全用藥，暫定有效期為1年。 3.復(fù)方中藥燒傷涂膜體外經(jīng)皮滲透性的研究 透皮吸收實驗中最理想的方法是對人皮進(jìn)行實驗研究，因為它闡述透皮吸收機(jī)制和求得的參數(shù)最接近臨床實際，但是人皮難于得到，參考了相關(guān)文獻(xiàn)本試驗采用Wistar大鼠作為實驗動物。 文獻(xiàn)報

9、道過的透皮吸收促進(jìn)劑種類繁多，考慮推廣到大生產(chǎn)，本文選擇了符合藥用標(biāo)準(zhǔn)并且使用最為廣泛的氮酮、薄荷腦和吐溫-80組合比較累積滲透釋放量，考察對樣品經(jīng)離體鼠皮的滲透促進(jìn)作用。結(jié)果表明氮酮與薄荷腦合用時對復(fù)方中藥涂膜透皮促滲作用最強(qiáng)，提示二者具較強(qiáng)的協(xié)同作用；氮酮、薄荷腦與吐溫80混合使用時促滲效果比氮酮加薄荷腦反有所下降，即無協(xié)同作用。我們最終選擇氮酮和薄荷腦聯(lián)用作為復(fù)方中藥涂膜的滲透促進(jìn)劑，且薄荷腦有芳香氣味，處方中加之味辛、涼，尤其適

10、用于外用藥物。 4.復(fù)方中藥燒傷涂膜皮膚刺激性試驗 選擇家兔為試驗動物，考察本制劑對完整皮膚和對破損皮膚的刺激性，經(jīng)皮膚刺激性反應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn)及刺激性強(qiáng)度評分標(biāo)準(zhǔn)評價，并經(jīng)HE染色后，顯微鏡下觀察皮膚有無炎性細(xì)胞浸潤、出血、壞死等情況。結(jié)果表明復(fù)方中藥燒傷涂膜多次給藥對家兔完整和破損皮膚均無刺激性。顯微鏡下觀察顯示：完整皮膚和破損皮膚給藥后表皮、真皮內(nèi)均未見充血、出血、壞死及炎性細(xì)胞。 復(fù)方中藥燒傷涂膜優(yōu)點在于：(