HSV-ⅠICP22對(duì)HCMV主要即刻早期啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)的效應(yīng)分析.pdf

1、人巨細(xì)胞病毒(Human cytomegalovirus，HCMV)和單純皰疹病毒(Herpes simDlex Virus，HSV)是同屬于皰疹病毒科、具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的DNA病毒，其所引起的病毒性疾病具有重要的流行病學(xué)意義。同時(shí)，由于這類(lèi)病毒的基因組具有類(lèi)似于真核細(xì)胞的復(fù)雜基因結(jié)構(gòu)，因而在真核基因表達(dá)調(diào)控機(jī)理的分子生物學(xué)研究和應(yīng)用工作中表現(xiàn)出重要韻意義。 人巨細(xì)胞病毒(HLlman cytomegalovirus，HCMV)主要

2、即刻早期(Ma．jorImmediate-Early，MIE)啟動(dòng)子在HCMV基因表達(dá)調(diào)控中起重要作用，并且具有很強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)能力，其順式調(diào)控元件在這一區(qū)域形成多次重復(fù)的特殊結(jié)構(gòu)，而這些元件及其組合方式在轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)過(guò)程中的生物學(xué)意義尚不清楚。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HSV-I即刻早期蛋白ICP22能對(duì)多種病毒及細(xì)胞啟動(dòng)子及增強(qiáng)子發(fā)揮極強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄抑制作用，但是作為HSV其中一個(gè)立即早期蛋白，人們對(duì)它的了解相對(duì)于其它四個(gè)立即早期蛋白還相對(duì)較少。因此，本實(shí)驗(yàn)的研

3、究重點(diǎn)是探討HSV-1病毒立即早期基因ICP22對(duì)各種真核基因啟動(dòng)子的抑制作用，并同時(shí)利用其對(duì)強(qiáng)啟動(dòng)子H(NV的主要即刻早期(Major Immediate-Early，MIE)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。 實(shí)驗(yàn)利用CAT(氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶)報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)ICP22對(duì)各種不同的HCMv即刻早期基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)元件及突變體轉(zhuǎn)錄活性的影響，結(jié)果顯示：盡管各種元件在ICP22存在的情況下表現(xiàn)出了各自獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄效應(yīng)，但它們組合后形成的不同突變體以及