RhoE在誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤凋亡中的研究.pdf

1、目的：探討 RhoE在誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡中的作用，為膠質(zhì)瘤分子靶向治療尋找新的靶點(diǎn)提供新方法。
　　方法：采用western blotting檢測(cè)RhoE在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系（人多形性惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞-T98、人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-A172、人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-U87）中的表達(dá)水平；構(gòu)建重組pcDNA3.1-RhoE真核表達(dá)載體，將質(zhì)?？焖俎D(zhuǎn)染U87細(xì)胞，采用四唑鹽法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化；Hoechst染色法觀察細(xì)胞核的形態(tài)改變

2、；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡的情況；western blotting分析細(xì)胞Bcl-2、Bax表達(dá)變化，以及capase-3和NF-κB的活化水平。
　　結(jié)果：
　　1、RhoE蛋白在T98、A172和U87細(xì)胞系中表達(dá)明顯低于正常人腦膠質(zhì)細(xì)胞(P<0.05)；
　　2、上調(diào)RhoE表達(dá)后，U87細(xì)胞增殖能力明顯下降（P<0.05），并且發(fā)生了顯著的細(xì)胞凋亡改變(P<0.05)；
　　3、上調(diào)RhoE表達(dá)后，west

3、ern bolt檢測(cè)顯示裂解的caspase-3水平增加、Bcl-2表達(dá)水平下降、Bax的表達(dá)水平升高；
　　4、上調(diào)RhoE表達(dá)后，NF-κB亞單位p65在細(xì)胞核中的表達(dá)降低。
　　結(jié)論：RhoE分子可能在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中起重要作用，上調(diào)RhoE的表達(dá)水平能夠有效抑制U87細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。RhoE可能通過抑制NF-κB的活性，下調(diào)Bcl-2/Bax的比例，從而促進(jìn)caspase-3的活化，最后誘導(dǎo)U87細(xì)胞發(fā)生凋亡