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文檔簡介
1、目的:研究FRK在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況;探討FRK(Fyn related kinase)對膠質(zhì)瘤U251、U87細(xì)胞增殖和凋亡的影響,從而為膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。
方法:1、采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測FRK在非腫瘤腦組織及腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況。2、通過Lipofectamine2000將pcDNA3.0-FRK質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到膠質(zhì)瘤U251、U87細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)分為空載體對照組(轉(zhuǎn)染pcDNA3.1)和
2、FRK過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染pcDNA3.0-FRK)。3、運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光、RT-PCR、蛋白免疫印跡等方法鑒定外源性的FRK在細(xì)胞中的表達(dá)情況。4、分別以CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測FRK對細(xì)胞增殖及凋亡的影響。
結(jié)果:1、RT-PCR結(jié)果顯示,與非腫瘤腦組織相比,F(xiàn)RK在膠質(zhì)瘤組織中呈低表達(dá)(P<0.01)。
2、細(xì)胞免疫熒光檢測顯示,轉(zhuǎn)染細(xì)胞48h,F(xiàn)RK轉(zhuǎn)染率達(dá)到70%左右;與空載體對照組相比,過表達(dá)組細(xì)胞
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