VEGF-C靶向USPIO分子探針在肝癌特異性磁共振成像中的應(yīng)用價(jià)值.pdf

1、研究背景：
　　肝細(xì)胞癌（hepato cellularcar cinoma，HCC）是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，超過(guò)50％的新發(fā)病例發(fā)生在中國(guó)，其病死率和復(fù)發(fā)率居高不下。HCC的侵襲、轉(zhuǎn)移以及極高的術(shù)后復(fù)發(fā)率是影響患者生存和預(yù)后的主要障礙。近年來(lái)研究表明，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)通過(guò)與其配體R3(VEGFR-3)的結(jié)合介導(dǎo)腫瘤淋巴管生成，是形成腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的最重要因素，因而VEGF-C也成為反映腫瘤淋巴管生成、提示腫瘤侵

2、襲轉(zhuǎn)移的一個(gè)較為特異的標(biāo)記物。目前HCC的診斷主要依賴影像學(xué)技術(shù)，但影像學(xué)對(duì)小病灶及不典型病灶診斷困難，同時(shí)對(duì)于腫瘤的轉(zhuǎn)移傾向也難以準(zhǔn)確評(píng)估。本研究構(gòu)建靶向VEGF-C的超小型超順磁性氧化鐵顆粒（ultra smallsu perparamagnetic ironoxidenan oparticles，USPIO）分子探針，應(yīng)用誘導(dǎo)性肝癌動(dòng)物模型進(jìn)行MR成像，旨在探討該探針在HCC特異性成像中的價(jià)值，同時(shí)基于此反映腫瘤的轉(zhuǎn)移傾向。

3、>　　目的：
　　探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)靶向超小型超順磁性氧化鐵(USPIO)分子探針在肝細(xì)胞肝癌中特異性MR成像中的價(jià)值。
　　方法：
　　胺基修飾的USPIO連接VEGF-C抗體后構(gòu)建VEGF-C-USPIO靶向分子探針。CCK-8法檢測(cè)VEGF-C-USPIO探針對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株（HUVEC）及HepG2細(xì)胞活性的影響。實(shí)驗(yàn)分為VEGF-C-USPIO組和USPIO組。將VEGF-C-USPI

4、O和USPIO（含鐵100μg/ml）按照20μl、40μl、80μl的劑量加入到HUVEC中孵育4h后，進(jìn)行MR成像，測(cè)量其T2WI，T2*，R2*信號(hào)強(qiáng)度(SI)。構(gòu)建大鼠原位肝細(xì)胞肝癌模型后隨機(jī)分為兩組（每組3只），分別于尾靜脈注射VEGF-C-USPIO或USPIO，注射劑量為20μmol/Kg，于注射前、注射后0.5h、1h及1.5h進(jìn)行磁共振成像，測(cè)量腫瘤組織T2WI及T2*WI的信號(hào)強(qiáng)度，并分析兩組增強(qiáng)前后各時(shí)間點(diǎn)上述測(cè)量

5、值的差異。細(xì)胞及腫瘤切片行普魯士藍(lán)染色以驗(yàn)證兩組標(biāo)本的鐵含量，免疫熒光驗(yàn)證HUVEC中VEGF-C的表達(dá)情況，免疫組化染色驗(yàn)證肝癌組織中VEGF-C的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度梯度、不同孵育時(shí)間VEGF-C-USPIO對(duì)HUVEC及HepG2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響均較小。細(xì)胞懸液磁共振成像顯示靶向組及非靶向組T2WI，T2*信號(hào)強(qiáng)度均隨VEGF-C-USPIO和USPIO的劑量增加而下降，R2*信

6、號(hào)強(qiáng)度隨劑量的增加而上升，在同一劑量(40μl，80μl)時(shí)兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。細(xì)胞普魯士藍(lán)染色顯示兩組細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒染色均隨劑量的增加而增多，而靶向組細(xì)胞內(nèi)染色鐵顆粒明顯多于非靶向組。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，VEGF-C-USPIO注射后較注射前肝臟腫瘤T2WI及T2*WI的信號(hào)強(qiáng)度均明顯下降，信號(hào)強(qiáng)度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中增強(qiáng)后1h下降程度最低;而注射USPIO后肝臟腫瘤信號(hào)強(qiáng)度下降不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)