海參蟲(chóng)草復(fù)劑降血糖作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、海參(sea cucumber)是具有較高食用和藥用價(jià)值的海洋生物資源?；瘜W(xué)分析及藥理學(xué)研究表明，海參體壁富含海參多糖、海參皂苷和海參蛋白多肽等多種活性物質(zhì)，具有抗腫瘤、抗氧化、降血壓和提高免疫力等生物活性。蛹蟲(chóng)草(Cordycepsmilitaris)是目前冬蟲(chóng)夏草的最佳替代品，其含有的活性成分包括蟲(chóng)草多糖、蟲(chóng)草酸和蟲(chóng)草素等，并證實(shí)具有增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化和降血糖等多種活性。目前已被列為我國(guó)的新資源食品。中醫(yī)理論認(rèn)為，海參性溫補(bǔ)

2、，蛹蟲(chóng)草味甘性平，二者組方合用，可增強(qiáng)生津養(yǎng)陰，益氣溫陽(yáng)的功效。本論文利用腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型，灌胃由日本刺參(Apostichopus japonicas)與蛹蟲(chóng)草配成的復(fù)劑，研究海參蟲(chóng)草復(fù)劑的降血糖活性，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。主要研究結(jié)果如下：
　　 海參蟲(chóng)草復(fù)劑具有顯著的降血糖作用。糖尿病大鼠灌胃給予海參蟲(chóng)草復(fù)劑35d后，大鼠空腹血糖含量顯著降低(P＜0.

3、01)。海參蟲(chóng)草復(fù)劑不但能顯著提高大鼠的葡萄糖耐量(P＜0.01)，提高機(jī)體對(duì)葡萄糖的耐受力，還能顯著提高大鼠血清胰島素含量(P＜o(jì).01)、胰島素分泌指數(shù)(P＜0.01)和β細(xì)胞功能指數(shù)(P＜0.05)；增加肌、肝糖元的含量(P＜0.01)。提示海參蟲(chóng)草復(fù)劑對(duì)糖尿病大鼠體內(nèi)葡萄糖代謝具有較好的調(diào)控作用。海參蟲(chóng)草復(fù)劑顯著地降低了糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白含量(P＜0.01)，表明海參蟲(chóng)草復(fù)劑能較好的控制糖尿病病情的發(fā)展。結(jié)果表明，海參蟲(chóng)

4、草復(fù)劑良好的降血糖效果與其有效改善體內(nèi)的葡萄糖代謝水平、控制病情惡化有關(guān)，并且海參蟲(chóng)草復(fù)劑的降血糖效果明顯好于海參、蛹蟲(chóng)草單劑作用。
　　 海參蟲(chóng)草復(fù)劑具有提高抗氧化能力和保護(hù)胰島β細(xì)胞的作用。海參蟲(chóng)草復(fù)劑能顯著提高肝臟中SOD、CAT和GSH-Px酶的活力(P＜o(jì).01)；高劑量海參蟲(chóng)草復(fù)劑能顯著提高胰腺中CAT酶活力(P＜0.01)。采用HE染色和透射電鏡技術(shù)研究了海參蟲(chóng)草復(fù)劑對(duì)糖尿病大鼠胰腺組織的顯微和亞顯微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)

5、果表明：灌胃海參蟲(chóng)草復(fù)劑的糖尿病大鼠，其胰島破壞程度減輕，形態(tài)恢復(fù)正常，胰島β細(xì)胞的數(shù)量明顯增多。電鏡下可觀察到β細(xì)胞結(jié)構(gòu)與正常對(duì)照組接近，細(xì)胞界限清晰。細(xì)胞核呈圓形，核膜光滑；核仁清晰且染色質(zhì)分布均勻：胞質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞器結(jié)構(gòu)腫脹程度較模型對(duì)照組明顯減輕。提示海參蟲(chóng)草復(fù)劑能提高機(jī)體和胰腺的抗氧化能力，較好的保護(hù)了胰島β細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使其結(jié)構(gòu)完整，提高其合成和分泌胰島素的功能。
　　 利用RT-PCR和Western Blot的方法檢測(cè)了

6、糖尿病大鼠外周組織中胰島素信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白激酶和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(Glucose transporter4，Glut4)的mRNA及蛋白表達(dá)，并對(duì)其降血糖機(jī)制進(jìn)行了探討。結(jié)果表明：海參蟲(chóng)草復(fù)劑能提高肌肉和脂肪組織中磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol3-kinase，PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B，PKB/Akt)和Glut4的mRNA表達(dá)。肌肉組織中，海參蟲(chóng)草復(fù)劑低、高劑量組P13K

7、 mRNA的表達(dá)量與模型對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.01)；高劑量能明顯提高Glut4 mRNA的表達(dá)。脂肪組織中，復(fù)劑高劑量組的PI3K mRNA表達(dá)量提高了42.86％，而復(fù)劑低、高劑量組Glut4的表達(dá)量平均提高了32.63％，相比于模型對(duì)照組均具有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)。另外，海參蟲(chóng)草復(fù)劑能增強(qiáng)糖尿病大鼠脂肪組織中Glut4的蛋白表達(dá)，呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系。提示海參蟲(chóng)草復(fù)劑通過(guò)調(diào)節(jié)胰島素信號(hào)通路，增強(qiáng)葡萄糖轉(zhuǎn)