乳源β-酪啡肽-7降血糖作用及其機制的研究.pdf

1、近年來，高血糖對機體的危害問題越來越引起人們的關(guān)注。高血糖發(fā)展到一定程度就稱為糖尿病(dibaetesmellitus， DM)。長期以來糖尿病一直被認為是一種嚴重危害健康的常見慢性終身疾病，而今已成為現(xiàn)代人類所面臨的一個主要健康問題。乳中含有多種活性成分，有報道認為其有降血糖作用，但作用的有效成分并不明確，本文以SD大鼠為實驗動物，研究主要的乳源活性肽β-酪啡肽7（β-casomorphin-7，β-CM7）對大鼠血糖水平的影響，探討

2、其可能的輔助降血糖作用及其機制。研究包括三個部分：
　　 試驗一β-CM7輔助降血糖的作用及機制初探
　　 選用健康成年SD大鼠16只，隨機分成對照組和試驗組，分別灌喂生理鹽水和β-CM7(7.5×10-6mol/L)。連續(xù)灌喂30天后，斷頸處死，取血清、肝臟及肌肉等進行如下試驗：1）氧化酶法測定血液中葡萄糖濃度；2）肝糖原、肌糖原含量的測定；3）血清中胰島素(insulin)、胰高血糖素（glucagon）水平的RIA

3、分析；4）小腸黏膜α-葡萄糖苷酶和Na+-K+-ATP酶活性分析；5）小腸黏膜組織中SGLT-1mRNA表達分析。試驗結(jié)果顯示：連續(xù)灌喂β-CM7大鼠血糖濃度較灌喂生理鹽水有降低，但二者之間差異不顯著(p＝0.35)；肝糖原、胰島素、胰高血糖素、α-葡萄糖苷酶活力、Na+-K+-ATP酶活力二組之間均無明顯差異；試驗組肌糖原含量低于對照組(p=0.001)：SGLT-1mRNA表達顯著低于對照組(p＝0.02)。結(jié)論：β-CM7具有輔助

4、降血糖作用，其機制可能是通過下調(diào)小腸黏膜上皮SGLT-1mRNA的表達，減少腸道葡萄糖的轉(zhuǎn)運，并增加肌糖原的消耗。
　　 試驗二β-CM7對大鼠腸道葡萄糖吸收的抑制及其機制
　　 利用翻轉(zhuǎn)的離體小腸模型研究了β-CM7對葡萄糖轉(zhuǎn)運和小腸黏膜Na+-K+-ATP酶活力的影響，同時利用納洛酮(NaL)阻斷劑與β-CM7按2：1濃度混合，探討了影響葡萄糖吸收的阿片機制。結(jié)果顯示，在離體情況下β-CM7在7.5×10-7---7

5、.5×10-5mol/L濃度范圍內(nèi)對葡萄糖的吸收均有一定的抑制作用，抑制作用與其濃度呈正相關(guān)（與0mol/L對照組相比，7.5×10-7mol/Lβ-CM7組（L組）p=0.09;7.5×10-6mol/Lβ-CM7組（M組）p=0.04;7.5×10-smol/Lβ-CM7組（H組）p=0.01）；能夠降低葡萄糖跨膜快速轉(zhuǎn)運期的平均速率(L組p=0.09;M組p=0.04;H組p=0.007)。能夠顯著降低Na+-K+-ATP酶活力，

6、與對照組相比，L組差異極顯著p=0.004; SGLT-1和GLUT-2Real-timePCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與對照組相比，L組、M組SGLT-1(p=0.02,0.05)和L組GLUT-2(p=0.03)mRNA表達水平顯著下降。阿片特異性拮抗劑納洛酮對β-CM7的抑制作用沒有明顯的逆轉(zhuǎn)。結(jié)果認為提示β-CM7可以通過非阿片樣途徑抑制小腸對葡萄糖的吸收，具有輔助降血糖作用，其機制可能是通過降低Na+-K+-ATP酶活力及下調(diào)SGLT-1、

7、GLUT-2mRNA的表達，從而減少了腸道葡萄糖的轉(zhuǎn)運有關(guān)。
　　 試驗三β-CM7降糖作用的細胞學驗證
　　 試驗一結(jié)果顯示：β-CM7能夠極顯著的降低大鼠肌糖原含量，對肝糖原含量無影響。在這個試驗中，我們將通過體外培養(yǎng)C2C12細胞和LO2細胞，對調(diào)控糖代謝的靶細胞進行篩選，同時觀察不同培養(yǎng)條件下β-CM7對C2C12細胞和LO2細胞葡萄糖消耗和細胞活力的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)β-CM7能明顯的促進高糖狀態(tài)下C2C12細胞對