桑椹黃酮的制備及其降血糖和降尿酸作用研究.pdf

1、傳統(tǒng)中藥桑椹子(Fructus Mori Albae)系?？浦参锷５某墒旃虢?jīng)晾曬干燥而成，藥典中桑椹子多以輔藥形式出現(xiàn)，其藥用價(jià)值有待進(jìn)一步豐富。本文首先就桑椹的主要功能成分含量進(jìn)行了測(cè)量，結(jié)果表明，烘至恒重的桑椹中黃酮含量為0.56％，多酚含量2.26％，花青素含量0.086％，多糖類(lèi)含量8.62％。采用高效液相色譜法測(cè)定了水解后的桑椹甲醇提取液中黃酮類(lèi)化合物的種類(lèi)和含量，結(jié)果顯示：桑椹中槲皮素含量為(1.506±0.022)mg/

2、g，山柰素含量(0.280±0.007)mg/g。
　　 論文確定了桑椹中黃酮類(lèi)物質(zhì)的提取方法：桑椹烘至恒重，粉碎過(guò)60目篩，石油醚脫脂，乙醇提取合并提取液，減壓回收乙醇，熱水復(fù)溶，待冷卻后乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯層顏色較淺為止，合并萃取液，減壓回收乙酸乙酯，得到桑椹粗黃酮(Ethylacetate Extract of Mulberry，EEM)。
　　 EEM體外生物學(xué)活性研究中，通過(guò)對(duì)DPPH自由基、羥基自由基和亞硝

3、酸鹽的清除作用以及對(duì)亞硝胺合成的阻斷作用，評(píng)價(jià)其抗氧化活性；通過(guò)α-葡萄糖苷酶體外抑制試驗(yàn)探索了EEM對(duì)大鼠小腸旺α-葡萄糖苷酶的抑制作用；通過(guò)黃嘌呤氧化酶體外抑制試驗(yàn)探討了EEM對(duì)大鼠肝臟黃嘌呤氧化酶的活性影響。結(jié)果表明，EEM清除DPPH自由基的能力較弱，但清除羥自由基和亞硝酸鹽的能力較強(qiáng)，并能有效阻斷亞硝胺的合成。EEM具有較好的抑制大鼠小腸α-葡萄糖苷酶活性作用，半數(shù)抑制濃度約12.50 mg/mL。同時(shí)EEM對(duì)大鼠肝臟黃嘌呤氧

4、化酶活性也有較好的抑制作用。
　　 體外活性實(shí)驗(yàn)表明，EEM具有較好的抑制大鼠小腸α-葡萄糖苷酶活性作用，提示EEM可能具有一定的血糖調(diào)節(jié)功能?？疾炝薊EM對(duì)STZ誘導(dǎo)的高血糖模型大鼠的影響，以100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg體重劑量的EEM連續(xù)灌胃3 w，每周測(cè)定血糖，第3 w處死大鼠，測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。灌胃第12 d，進(jìn)行糖耐量實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，EEM可顯著緩解高血糖大鼠體重下降，有效降低大鼠血清葡萄糖和

5、果糖胺水平，同時(shí)OGTT實(shí)驗(yàn)表明300 mg/kg EEM能夠有效改善糖尿病大鼠口服糖耐量異常。
　　 基于前期體外活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，EEM具有較好抑制黃嘌呤氧化酶活性，本研究進(jìn)一步探討了EEM對(duì)高尿酸血癥模型小鼠影響。結(jié)果顯示100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg體重劑量三個(gè)劑量的EEM均可顯著降低高尿酸血癥大鼠的尿酸水平。同時(shí)EEM可以顯著降低大鼠血清尿素氮和肌酐的水平，表明EEM具有較好的保護(hù)腎臟作用。此外

6、，EEM可顯著降低高尿酸大鼠異常升高的血清甘油三酯和游離脂肪酸水平，顯示出EEM對(duì)高尿酸模型大鼠的血脂水平具有較好的調(diào)節(jié)作用。大鼠腎臟的電鏡觀察結(jié)果顯示，較之正常組，模型組與AP組腎臟細(xì)胞明顯畸形化，且細(xì)胞核不清晰、核孔模糊，線粒體數(shù)量減少。而EEM各個(gè)治療組則情況顯著改善，進(jìn)一步驗(yàn)證了EEM對(duì)腎臟具有一定的保護(hù)作用。
　　 而后著重探討了桑椹黃酮的提取制備工藝，并繪制了桑椹黃酮(MulberryFlavonoid，MFV)制備

7、設(shè)備工藝流程圖，初步分析了制備過(guò)程中的主要能耗。并對(duì)經(jīng)實(shí)驗(yàn)室純化得出的MFV進(jìn)行體外活性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明MFV和EEM功能相似，均具有較好的體外抗氧化活性并能顯著抑制α-葡萄糖苷酶與黃嘌呤氧化酶活性。
　　 綜上，水解后的桑椹黃酮中主要黃酮苷為槲皮素與山柰素，且EEM和MFV均具有顯著的體外抗氧化活性和對(duì)α-葡萄糖苷酶與黃嘌呤氧化酶活性抑制作用。EEM可以顯著降低高血糖大鼠血糖水平，同時(shí)EEM可以降低高尿酸血癥大鼠尿酸水平，并對(duì)腺