SD大鼠膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型的建立及其病理特征.pdf

1、骨性關(guān)節(jié)炎(OA)是一種復(fù)雜的關(guān)節(jié)退變性疾病，以進(jìn)行性軟骨退變、軟骨下骨的改變以及滑膜炎為特征。目前其確切的發(fā)病機(jī)制還不太清楚，且臨床治療效果不太令人滿意。本實(shí)驗(yàn)通過前交叉韌帶、內(nèi)側(cè)副韌帶的切斷及內(nèi)側(cè)半月板的切除來建立大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型并觀察其病理特征，為骨關(guān)節(jié)炎的軟骨下骨研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 選用體重320～400g10周齡的SD大鼠雄性54只共4批，體重配對后隨機(jī)將其分為手術(shù)組和假手術(shù)組，水合氯醛腹腔麻醉

2、，選取右側(cè)膝關(guān)節(jié)作手術(shù)側(cè)。常規(guī)備皮消毒，手術(shù)組：沿髕韌帶內(nèi)側(cè)緣切口，打開關(guān)節(jié)囊后，切斷前交叉韌帶、內(nèi)側(cè)副韌帶，切除內(nèi)側(cè)半月板，關(guān)閉關(guān)節(jié)腔，并行皮層的切口縫合，術(shù)后肌注一次青霉素4萬單位抗感染，待SD大鼠清醒后曲馬多(10mg/kg)止痛，假手術(shù)組處理方法一致，但不切除前交叉韌帶、內(nèi)側(cè)副韌帶及內(nèi)側(cè)半月板。分別于術(shù)后1、
　　 2、4及6周處死，對軟骨退變情況行大體觀察及組織學(xué)觀察并OARSI評分。
　　 結(jié)果：
　　

3、 大體觀察可見術(shù)后1周表面色澤開始變暗，2周后出現(xiàn)粗糙，色澤灰暗，4周可見表面暗黃，骨贅形成，6周關(guān)節(jié)軟骨面減少，塌陷，骨贅明顯；組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)術(shù)后1周可見表面有輕微纖維素增加，軟骨下骨小梁變薄。術(shù)后2周表面纖維素有剝脫，細(xì)胞數(shù)目增多，軟骨細(xì)胞簇集，番紅O染色開始減退，術(shù)后4周，裂隙深達(dá)鈣化層，細(xì)胞彌漫性增多，細(xì)胞簇集明顯，潮線不完整，番紅O染色明顯減退，術(shù)后6周細(xì)胞數(shù)目明顯減少，軟骨層變薄，番紅O染色重度減退，出現(xiàn)多重潮線。骨小梁增

4、厚，從1周開始手術(shù)組OARSI評分增高，且與假手術(shù)側(cè)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 通過前交叉韌帶、內(nèi)側(cè)副韌帶切斷、內(nèi)側(cè)半月板的切除后，是隨時間的增加而加重，其病理變化與OA病人相似，表明SD大鼠膝關(guān)節(jié)OA模型建立成功。
　　 同時為提取軟骨下骨完整的總RNA，對軟骨和軟骨下骨的分離進(jìn)行摸索，通過幾種不同方法的對比研究，發(fā)現(xiàn)通過提高整個操作的熟練度以縮短標(biāo)本處理時間，在液氮下，用電動磨具打