白色念珠菌基因CaFSP1的功能研究和CaMCI4基因的敲除.pdf

1、本研究克隆了釀酒酵母ScYMR034c的白色念珠菌同源基因CaFSP1，發(fā)現(xiàn)它編碼一個411個氨基酸，與ScYMR034c編碼的氨基酸序列一致性為57％，相似性為73％。根據(jù)DNA同源重組的原理，構(gòu)建了CaFSP1的缺失菌株，其基因型得到PCR和Southern雜交的證實。表型研究發(fā)現(xiàn)CaFSP1基因的缺失導(dǎo)致細(xì)胞膜完整性受到破壞，造成白色念珠菌細(xì)胞對SDS、NaCl、CaCl2和KCl敏感，對LiCl、H2O2和ZnCl2產(chǎn)生耐受性，

2、對抗真菌藥物酮康唑和特比耐芬產(chǎn)生抗藥性。此外，CaFSP1基因的缺失促進(jìn)白色念珠菌在Spider培養(yǎng)基中菌絲的形成，但是局限了菌落向外周浸入生長的能力。引入克隆的CaFSP1基因能夠恢復(fù)fsp1缺失株所有的表型。我們推測CaFSP1基因與白色念珠菌細(xì)胞的固醇和鞘脂的代謝有關(guān)，這兩個成分對維持細(xì)胞膜正常功能和白色念珠菌的形態(tài)轉(zhuǎn)化非常重要。我們還對CaFSP1在酵母中的同源基因ScYMR034c的功能進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)酵母ymr34c△菌株也