金針茹和靈芝藥用成分獲取技術(shù)的優(yōu)化.pdf

1、靈芝是一種著名的藥用真菌，它對于腫瘤病輔助治療、慢性支氣管炎、冠心病、肝炎、高血脂癥、神經(jīng)衰弱、皮肌炎等疾病均有不同程度的療效。金針菇作為一種藥食兼用的真菌，可預(yù)防和治療肝炎、胃腸潰瘍，并具有抗癌、降低血清膽固醇的作用。傳統(tǒng)培養(yǎng)這兩種真菌的方法費時費力，且品質(zhì)不易控制。隨著現(xiàn)代科學(xué)生產(chǎn)的發(fā)展，采用液體深層發(fā)酵技術(shù)可以對這兩種真菌進行大規(guī)模生產(chǎn)，具有生產(chǎn)量大、占地少、周期短，生產(chǎn)過程易于控制等優(yōu)點。從這兩種真菌中提取的具有免疫調(diào)節(jié)功能的小

2、分子蛋白--真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白，具有凝集血細(xì)胞的生物活性，同時也表現(xiàn)出促進淋巴細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)免疫細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子等免疫調(diào)節(jié)活性。
　　 本論文對靈芝和金針菇菌絲體的液體深層發(fā)酵工藝進行了初步的研究。將兩種菌絲體在以花生和大豆為不同氮源配比的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，檢測兩種菌絲體在搖瓶和靜止培養(yǎng)板兩種不同培養(yǎng)方式中的生長狀況及干鮮重比較，對在六種不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)的兩種菌絲體的生物學(xué)特性進行了測定。試驗結(jié)果表明，靜止培養(yǎng)的兩種菌絲體干、鮮重

3、明顯高于搖瓶培養(yǎng)；靜止培養(yǎng)下，花生培養(yǎng)基中的菌絲體中總蛋白含量略高于大豆培養(yǎng)基、總糖含量基本等同于大豆培養(yǎng)基中，但每升花生培養(yǎng)基的成本高于大豆培養(yǎng)基。因此優(yōu)化的液體深層發(fā)酵菌絲體培養(yǎng)基為含有20g/L大豆粉的培養(yǎng)基。
　　 以畢赤酵母為宿主進行了金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白的重組表達(dá)，通過苯酚-硫酸法對重組蛋白純品糖含量的分析表明，重組真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白在酵母表達(dá)載體中可能發(fā)生了糖基化修飾。經(jīng)過優(yōu)化重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)技術(shù)和純化技術(shù)，獲得了高表