燈盞花素對大鼠肺纖維化的預防作用及其機制研究.pdf

1、目的：探討燈盞花素對肺纖維化大鼠肺組織纖維化過程的作用和機制。觀察燈盞花素對大鼠肺組織炎癥程度、膠原纖維形成的影響。在分子水平通過對TGF-β1及其下游傳導通路的研究，初步探討燈盞花素的干預機制。 材料和方法：將30只SD大鼠隨機分為模型組、對照組、燈盞花素組，模型組以博來霉素氣管內(nèi)注入建立模型，對照組以生理鹽水氣管內(nèi)注入，燈盞花素組以博來霉素氣管內(nèi)注入并以燈盞花素進行干預治療，于第29天將大鼠處死并檢測。以HE染色和細胞核顆粒

2、計數(shù)觀察肺組織炎癥程度，以膠原染色檢測總膠原蛋白，以免疫組化法(SP法)檢測Ⅰ型膠原纖維，以原位雜交法檢測TGF-βR Ⅱ mRNA和Smad4 mRNA，以實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測TGF-β 1 mRNA。 結(jié)果： 1．對照組、模型組和燈盞花素組的細胞核顆粒數(shù)分別為：11496.8、 22243.6和13465.5，模型組細胞核顆粒數(shù)大于對照組，燈盞花素組 細胞核顆粒數(shù)則明顯小于模型組。顯示出燈盞花

3、素在肺纖維化形成 中可抑制炎癥，進而抑制其后的炎癥損傷和修復過程。 2．對照組、模型組和燈盞花素組的總膠原的I0D值分別為：0.2318667、 0.9578114和0.5116850，模型組總膠原纖維的表達較對照組明顯增強，燈盞花素組膠原纖維的表達較模型組顯著減弱。對照組、模型組和燈盞花素組的I型膠原的I0D值分別為：0.3234213、O.9347503 和O.3116736，也顯示模型組I型膠原的表達大于對照組，

4、燈盞花素 組則明顯小于模型組。說明燈盞花素在肺纖維化過程中可抑制總膠原纖維和I型膠原纖維，而膠原纖維則是肺纖維化形成的主要結(jié)構(gòu)物質(zhì)。 3．對照組、模型組和燈盞花素組TGF-β1mRNA的相對拷貝數(shù)的負對數(shù)(RT-PCR法)分別為：3.006、1.914和2.712；對照組、模型組和燈盞花素組TGF-βRII mRNA的I0D值(原位雜交法)分別為：0.069868l、0.1648234和0.1809094；對照組、模型組和燈

5、盞花素組Sma．d4 mRNA的10D值(原位雜交法)分別為：O．0735620、O.1717242和0.0956901。 從以上數(shù)據(jù)可以看出：燈盞花素對TGF-βl mRNA和Smad4 mRNA的表達有抑制作用，但未觀察到燈盞花素對TGF-βRIImRNA產(chǎn)生有統(tǒng)計學意義的影響。 結(jié)論：燈盞花素可抑制炎癥、抑制總膠原纖維和I型膠原纖維的合成。燈盞花素對博來霉素所致大鼠肺纖維化有一定的抑制作用。燈盞花素可能通過對TGF