甘利欣對大鼠肺纖維化的治療作用及機制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1.建立大鼠肺纖維化動物模型,探討甘利欣(18a-甘草酸二銨)對博萊霉素所致的大鼠肺纖維化的治療作用及機制;2.對比甘利欣低劑量、中劑量、高劑量治療效果,探討出的最佳治療劑量。 方法: 將SD級雄性大鼠60只,體重180g±20g,隨機分成6組:博萊霉素所致大鼠肺纖維化模型組、生理鹽水對照組、甘利欣低劑量(25mg/kg)、中劑量(50mg/kg)、高劑量(100mg/kg)、地塞米松(Dexametha

2、sone,DXM)治療組,每組10只。博萊霉素致肺纖維化動物模型第28天開始,各治療組在每天同一時間段內連續(xù)14天腹腔內注射。治療的劑量分別為地塞米松注射液3mg·kg-1·d-1(濃度為5mg/ml)、甘利欣低劑量25mg·kg-1·d-1、中劑量50 mg·kg-1·d-1、高劑量100 mg·kg-1·d-1劑量;在治療后第15天取大鼠左肺下葉1cm×1cm×1cm大小的組織,固定于10%甲醛溶液,供免疫組化FGF-β1、IFN-

3、γ表達觀察;同樣取大鼠右肺下葉供HE染色病理觀察。抽取大鼠6-8ml血液靜置30分鐘后中速離心15分鐘,取其血清用ELISA雙抗體夾心法測定各組大鼠血清白細胞介素4(IL-4)、IFN-γ含量。 結果: 1.采用分級方法定性評價HE染色大鼠肺組織的肺纖維化程度,發(fā)現甘利欣各治療組、DXM治療組大鼠肺纖維化程度均較輕微。2.BLM組大鼠肺組織TGF-β1染色呈強陽性反應,成纖維細胞、肌纖維母細胞等間質細胞陽性反應增強。提示

4、TGF-β1參與了肺纖維化和組織修復反應,并對于細胞外基質持續(xù)過量沉積具重要作用。甘利欣各治療組、DXM治療組陽性反應細胞較少;免疫組化TGF-β1定量分析結果顯示:與模型組相比,對照組、地塞米松組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的p值分別為0.001、0.000、0.000、0.010、0.001,有顯著差異,模型組肺組織中TGF-β1表達強烈;低劑量組均數與中劑量組、高劑量組均數相比,p值分別為0.448、1.000,中劑量組與高劑量

5、組均數相比,p=0.997,即甘利欣各治療組之間對大鼠肺組織TGF-β1的影響無差異。3.甘利欣各治療組、DXM治療組巨噬細胞等炎性細胞IFN-γ強陽性反應,成纖維細胞、肌纖維母細胞等間質細胞陽性反應減弱,免疫組化IFN-γ各組數據顯示,低劑量組與對照組、模型組、中劑量組均數相比均數相比,p值分別為0.007、0.014、0.004,即甘利欣低劑量組對IFN-γ的影響效果與對照組、模型組、中劑量組相比有顯著的差異,而與高劑量組均數相比,

6、p=0.138無統(tǒng)計學意義。4.模型組大鼠血清IL-4含量較高,而IFN-γ含量較低,甘利欣各治療組、DXM治療組大鼠血清IL-4含量較低,而IFN-γ含量較高。甘利欣低、中、高劑量組三組大鼠血清IL-4與模型組比較存在差異(P<0.05),而甘利欣各組兩兩比較無顯著差異(P>0.05)。大鼠血清IFN-γ各組均數方差分析F=8.337,p=0.000,有統(tǒng)計學意義,各組的總體均數有明顯差異;模型組與對照組、地塞米松組、甘利欣低劑量組、

7、中劑量組、高劑量組相比,p值分別為0.003、0.001、0.000、0.000、0.000,存在非常顯著差異,而地塞米松組、苷利欣低劑量組、中劑量組、高劑量組兩兩相比無差異(P>0.05)。 結論: 甘利欣各治療組大鼠普通病理顯示肺損傷較輕微,肺組織內TGF陽性反應細胞陽性染色顯著少于BLM組,而肺組織內IFN-γ陽性反應細胞陽性染色顯著多于BLM組;各指標與DXM組比較無顯著差異。說明甘利欣具有較強的抗肺纖維化作用,

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