聚乙二醇化內(nèi)皮抑素抑制小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文聚乙二醇化內(nèi)皮抑素抑制小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李志偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：牟國(guó)營(yíng)20060305山東大學(xué)碩士學(xué)位論文聚乙二醇化內(nèi)皮抑素抑制小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究研究生：李志偉導(dǎo)師：牟國(guó)營(yíng)中文摘要目的內(nèi)皮抑素是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的強(qiáng)效抑制劑。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮抑素能特異性抑制處于增殖狀態(tài)的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞、并伴有誘導(dǎo)凋亡的作用。然而最近的I期臨床試驗(yàn)研究結(jié)果表明，內(nèi)皮抑素

2、體內(nèi)半衰期短，生物利用度低。如果能夠通過(guò)一定的手段提高其生物利用度、延長(zhǎng)其體內(nèi)半衰期以減少給藥劑量或延長(zhǎng)給藥周期，將會(huì)大大提高內(nèi)皮抑素的治療效果，促進(jìn)其在臨床上的應(yīng)用。本課題旨在觀察聚乙二醇(PEG)修飾后的內(nèi)皮抑素抑制高氧誘導(dǎo)的大鼠視網(wǎng)膜新生血管的效果，探討其作用機(jī)制。材料與方法1PECrES的制備采用氧化法制備聚7醇二酸，然后用聚乙二醇二酸單端封閉分子量為10ku的活化PEG，使用單端封閉的活化聚乙二醇(MWlOku)修飾內(nèi)皮抑素，

3、并采用Gillis等報(bào)道的CTLL2細(xì)胞短期培養(yǎng)、結(jié)合3H2TdR滲入法進(jìn)行修飾產(chǎn)物的分離、提純及生物活性測(cè)定。2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用高氧誘導(dǎo)法建立小鼠RNV模型，將PEGES注入小鼠的玻璃體腔，處死后做組織切片，觀察視網(wǎng)膜新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量及VEGF、PEDF的表達(dá)情況。3結(jié)果成功的應(yīng)用聚乙二醇單端修飾了內(nèi)皮抑素，并檢測(cè)了其生物活性。C組(PEG內(nèi)皮抑素組)和B組(單純內(nèi)皮抑素組)RNV的長(zhǎng)度、面積、微血管數(shù)量均明顯少于對(duì)照組(pO05)；