漢族人群酒精性肝病中ADH2、ALDH2與CYP2E1基因多態(tài)性研究.pdf

1、目的: 檢測乙醇脫氫酶(ADH)、乙醛脫氫酶(ALDH)和細胞色素P4502E1(CYP2E1)不同等位基因型頻率在健康對照組、酒精性肝病(ALD)組、嗜酒無肝病組和非酒精性肝病(NALD)組中的差異，研究不同ADH、ALDI{和CYP2E1等位基因及其編碼的不同酶活性的產(chǎn)物在酒精性肝病的發(fā)病機制中所起的作用，從遺傳學(xué)角度揭示酒精性肝病的發(fā)病機制，并為臨床酒精中毒和酒精性肝病的防治提供理論依據(jù)。 方法:觀察健康對照組(23例)

2、，ALD組(27例),嗜酒無肝病組(7例)和NALD組(24例),病例均為漢族男性,年齡為25-80歲，總體平均年齡為(48.33±14.31)歲?？崭钩槿⊥庵莒o脈血5ml，分離白細胞,抽取DNA,進行PCR擴增。電泳檢測確定擴增產(chǎn)物生成。取各自的擴增產(chǎn)物，分別加入內(nèi)切酶進行消化: MaeⅢ消化ADH2基因的擴增產(chǎn)物以檢驗ADtt2*1和ADH2*2等位基因；MboⅡ消化ALDH2基因的擴增產(chǎn)物以檢測ALDtt2*1和ALDtt2*2等

3、位基因；RsaI與PstI消化CYP4502E1基因擴增產(chǎn)物以檢測c1和c2等位基因。分別取ADH2與AL，DH2基因消化后的產(chǎn)物在15[％]的聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳,然后溴化乙錠(EB)染色，凝膠成像系統(tǒng)分析；CYP2E1基因消化后的擴增產(chǎn)物于2.0[％]瓊脂糖凝膠上進行電泳，紫外射線下觀察，凝膠成像系統(tǒng)分析，確定等位基因的基因型。 結(jié)果:ADtt2*1等位基因表達在健康對照組、ALD組、嗜酒無肝病組和NALD組的頻率分別

4、為10.87[％]、11.11[％]、42.86[％]和12.5[％]；ADH2*2等位基因表達在各組中的頻率分別為89.13[％]、88.89[％]、57.14[％]和87.5[％]；兩種等位基因在四組中的分布有顯著差異(P<0.05)；ALD組與嗜酒無肝病組中的分布有顯著差異(P(0.05)。ALDH2*1等位基因表達在健康對照組、ALD組、嗜酒無肝病組和NALD組的頻率分別為56.52[％]、87.04[％]、85.71[％]和5

5、4.17[％];ALDH2*2等位基因表達在各組中的頻率分別為43.78[％]、12.96[％]、14.29[％]和45.83％；兩種等位基因在四組中的分布有顯著差異(P<0.05)；在ALD組與健康對照組、ALD組與NALD組中的分布有顯著差異(P<0.05)；CYP2E1c1等位基因在健康對照組、ALD組、嗜酒無肝病組和NALD組的頻率分別為84.78％、51.85％、100％和81.25％；c2等位基因在各組中的頻率分別為15.2

6、2％、48.15％、0％和18.75％；兩種等位基因在四組中的分布有顯著差異(P<0.05)；ALD組等位基因表達與其他各組比較有顯著差異(P(0.05)。 結(jié)論：(1)ADH2基因多態(tài)性與嗜酒依賴有關(guān)，而與酒精性肝病的發(fā)生無明顯相關(guān)性。(2)ALDH2基因多態(tài)性與酒精性肝病的發(fā)生關(guān)系密切，等位基因ALDH2*2在中國漢族人群中是一種酒精中毒和酒精性肝病的負性危險因素，純合子的ALDH2*2可防止酒精中毒和酒精性肝病的發(fā)生。(3