Copolymer1 (COP1)對高眼壓大鼠視神經(jīng)保護(hù)作用的評價(jià)及相關(guān)免疫學(xué)機(jī)理的研究.pdf

1、研究背景:青光眼是世界第二大致盲性眼病,是一類非常復(fù)雜的眼病或綜合征群。其本質(zhì)性的病理改變是視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglion cell,RGC)的凋亡。目前所有的青光眼治療都是針對降低眼壓所進(jìn)行的,但青光眼已經(jīng)不再被簡單地認(rèn)為是單純眼壓升高而引起的視神經(jīng)損傷疾病,除了降低眼壓外,如何使RGC免于凋亡,有效地保護(hù)視神經(jīng),已成了青光眼治療的重要研究方向。
　　 Copolymer1(Copl)是美國FDA批準(zhǔn)的一種用

2、于治療多發(fā)性硬化的藥物,化學(xué)名glatiramer acetate,可以主動(dòng)地和被動(dòng)地激活T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),以發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)通過Copl對實(shí)驗(yàn)性高眼壓性青光眼的RGC的作用的觀察以及產(chǎn)生該作用的相關(guān)免疫學(xué)機(jī)理的探討,為探索該藥在抗青光眼視神經(jīng)損害的臨床使用的可能性提供實(shí)驗(yàn)研究的依據(jù)。
　　 對象與方法:1.65只成年Wistar雄性大鼠,燒灼右眼上方2支和外側(cè)1支鞏膜上靜脈,建立大鼠慢性高眼壓模型。左眼作為對照眼

3、。對造模成功的大鼠,分別于造模后1天,1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周各摘除6只造模成功的大鼠雙眼。在取出眼球前24小時(shí),用Fluorogold進(jìn)行RGC逆行性染色,做視網(wǎng)膜鋪片計(jì)數(shù)RGC,觀察不同時(shí)段高眼壓對RGC的影響。2.制作30只大鼠雙眼高眼壓模型,在眼壓升高的第3周,于15只模型大鼠后腳皮內(nèi)注射100μg Cop1和等體積的Complete Freund’s Adjuvant(CFA)混合乳化液。另外15只模型大鼠作

4、為對照組,皮內(nèi)注射等體積的PBS和CFA的混合乳化液。1周后取出大鼠視網(wǎng)膜,比較兩組RGC細(xì)胞數(shù)和視神經(jīng)乳頭淋巴細(xì)胞浸潤的差別。3.所有動(dòng)物均在摘除眼球的同時(shí)取出脾淋巴細(xì)胞,通過流式細(xì)胞儀比較其T細(xì)胞亞群的變化和ELISA檢測T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的變化。
　　 結(jié)果：1.右眼鞏膜上靜脈燒灼后1天、1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周造模眼平均眼壓分別為42.22±1.75mmHg、37.89±2.33mmHg、36.13±1

5、.97mmHg、33.38±2.09mmHg、32.24±2.41mmHg、30.11±2.01mmHg、30.59±2.15mmHg、27.62±1.32mmH。術(shù)后1天、1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周的成模率分別為80.00％、76.92％、74.58％、71.70％、63.83％、56.10％、42.86％、41.38％。成模率和成模眼的眼壓隨時(shí)間延長呈下降趨勢。實(shí)驗(yàn)組和對照組的RGC密度在早期(鞏膜上靜脈燒灼術(shù)后3周

6、內(nèi))沒有顯著差別。造模后第4周高眼壓組RGC密度明顯低于對照組,隨著時(shí)間的推移差別越來越顯著。2.Copl處理后1周,高眼壓模型眼的視網(wǎng)膜鋪片可見視神經(jīng)大量淋巴細(xì)胞聚集。Copl處理組的RGC損失率(10.24％)低于對照組(29.00％)。3.Copl處理組CD4+CD25+Treg/CD4+比值顯著高于對照組。INF-γ的分泌無顯著差別,IL-10的分泌實(shí)驗(yàn)組高于對照組,兩組Copl體外刺激淋巴細(xì)胞增殖程度相同。
　　 結(jié)論