大鼠慢性高眼壓模型視神經(jīng)損害及保護(hù)研究.pdf

1、目的:構(gòu)建大鼠慢性高眼壓模型并評(píng)估視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變;觀察低氧預(yù)處理對(duì)大鼠慢性高眼壓損傷是否存在視神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法:健康成年Fischer344大鼠,8-12周齡,共75只。1)532激光經(jīng)角膜(經(jīng)角膜組,n=20)及經(jīng)房角鏡下(放角鏡組,n=14)光凝大鼠右眼小梁網(wǎng),激光后3用Tonolab眼壓計(jì)測(cè)量雙眼眼壓;第3周對(duì)經(jīng)角膜組(n=4),房角鏡組(n=6)Tuj-1標(biāo)記的視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù)并與正常大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞數(shù)(n=3)

2、進(jìn)行比較。2)大鼠低氧預(yù)處理(11％O2,2小時(shí))24小時(shí)后,用經(jīng)角膜激光光凝右眼小梁網(wǎng)作為實(shí)驗(yàn)組(n=4),單純激光組作為對(duì)照組(n=6),觀察激光后雙眼眼壓,第18天采用免疫組織化學(xué)法對(duì)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù),并觀察膠質(zhì)細(xì)胞變化;觀察低氧預(yù)處理后視網(wǎng)膜低氧誘導(dǎo)因子1α(免疫組化法)及EPO蛋白(western blot法)表達(dá)變化。多組間比較采用單因素方差分析,兩兩比較采用Bonferroni檢驗(yàn);兩組間多種數(shù)據(jù)比較采用多元方差分析(Wi

3、lks'λ檢驗(yàn)),對(duì)于觀察值相差較大數(shù)據(jù)采用對(duì)數(shù)變換方法進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:1)經(jīng)角膜激光組14只大鼠中6只(43%)需二次激光;房角鏡下激光組(房角鏡組)23只大鼠中有20只(87%)經(jīng)單次激光后眼壓持續(xù)升高,其余3只大鼠激光后3眼壓降至正常,其眼壓數(shù)據(jù)未予計(jì)入。角膜組平均眼壓24.4±7.4mmHg,峰眼壓48.6±9.8mmHg,節(jié)細(xì)胞數(shù)目645.2.4±204.5/mm2;房角鏡組平均眼壓為26.6±6.8mmHg,峰眼

4、壓為43.7±10.8,節(jié)細(xì)胞存活密度為1141.4±241.5/mm2,正常眼視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞為1984.0±161.3/mm2。房角鏡和角膜組間各項(xiàng)眼壓值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=1.000),各組激光眼與對(duì)照眼各項(xiàng)眼壓值皆存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)。經(jīng)角膜組及房角鏡視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞組與正常眼視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞比較,均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001,P=0.016),兩模型組間亦有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.001)。對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組平均眼壓分別為:2

5、3.2±5.0mmHg,23.2±4.4mmHg;峰眼壓分別為:42.8±12.3mmHg(n=6)、45.0±6.8mmHg,視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞密度分別為631.6±339.6/mm2,1100.8±279.1/mm2。兩組間各項(xiàng)眼值壓皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=1.0),而視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(p<0.005)。兩組大鼠激光眼及對(duì)側(cè)眼視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞均有不同程度激活,單次低氧預(yù)處理聯(lián)合高眼壓組中對(duì)側(cè)眼膠質(zhì)細(xì)胞激活程度及范圍相對(duì)輕微。低氧預(yù)處理