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1、探討雌激素對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護作用及可能的機制。 方法60只去勢雌性SD大鼠隨機分為兩組,前房灌注升高眼內(nèi)壓,建立視網(wǎng)膜缺血再灌注(RIR)模型。實驗組在升高眼內(nèi)壓前兩個小時皮下注射17β-雌二醇(100μg/kg),對照組大鼠皮下注射等量的植物油。分別于視網(wǎng)膜缺血前,再灌注后12h、24h、48h、72h采用化學發(fā)光法測定血清雌二醇水平,對視網(wǎng)膜進行常規(guī)HE染色,觀察神經(jīng)節(jié)細胞丟失情況及測量視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度。采用末端
2、脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶介導的脫氧三磷酸尿苷缺口末端標記法(TUNEL法)檢測視網(wǎng)膜組織中凋亡細胞的表達。利用免疫組化SABC法檢測bcl-2、bax、caspase-3蛋白表達,原位雜交檢測caspase-3和NF-κBmRNA在視網(wǎng)膜的表達和定位,及熒光實時定量RT-PCR觀察各組大鼠視網(wǎng)膜bcl-2,bax,caspase-3mRNA表達情況。結(jié)果對照組雌激素水平明顯低于實驗組。光鏡下計數(shù),實驗組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)較對照組多(p<0.01)
3、;視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度實驗組較對照組厚。實驗組再灌注后24h、48h的凋亡細胞數(shù)目明顯低于對照組(p<0.01)。實驗組caspase-3、bax和NF-κBmRNA及蛋白水平較對照組明顯降低;bcl-2mRNA及蛋白水平較對照組升高,差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)論雌激素對缺血再灌注大鼠神經(jīng)節(jié)細胞病理損害有保護作用。細胞凋亡可能在視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷過程中起重要作用,雌激素可能通過降低caspase-3、bax和NF-κBmRNA,升高bc
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