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文檔簡介
1、探討雌激素對兔視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷(RIRI)的影響,并通過觀察谷氨酸濃度改變和細胞凋亡發(fā)生以及Fas/Fas-L在視網(wǎng)膜中表達的改變探討雌激素對RIRI中視網(wǎng)膜功能保護的可能的機制。 材料與方法: 新西蘭白兔50只隨機分組,對照A組和實驗A組各10只,對照B組和實驗B組各15只,其中對照B組和實驗B組根據(jù)再灌注發(fā)生時間再分為12h、24h、72h三組,每組5只,各組右眼應用前房灌注加壓法使前房內(nèi)壓力升高至120mmH
2、g維持60min后再灌注,建立視網(wǎng)膜缺血/再灌注模型,左眼為空白對照眼。所有實驗組在前房灌注前2 h皮下注射17 β-雌二醇(17 β-estrodiol,0.1 mg/kg),對照組給予等量生理鹽水皮下注射。對照A組和實驗A組在建模前半小時記錄各眼閃光視網(wǎng)膜電圖(ERG),并在再灌注即時及第4h、8h、24h分別復測ERG,與缺血前相比觀察a、b波的變化;最后一次ERG檢測后,立即摘除眼球, 采集視網(wǎng)膜組織,研磨及蛋白沉淀后,使用日立
3、L-8800氨基酸自動分析儀檢測游離谷氨酸(Glu)濃度。對照B組和實驗B組分別在再灌注后12h、24h、72h摘取眼球,對視網(wǎng)膜進行常規(guī)HE染色切片,觀察細胞丟失情況及測量視網(wǎng)膜內(nèi)層厚度,應用鏈酶卵白素-生物素復合體免疫組織化學法檢測視網(wǎng)膜組織中Fas/Fas-L的表達變化,同時采用末端脫氧核酸轉(zhuǎn)移酶介導的脫氧三磷酸尿苷缺口末端標記(TUNEL)法檢測視網(wǎng)膜組織中凋亡細胞。 結(jié)論:雌激素對視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷有治療作用。兔視
4、網(wǎng)膜缺血/再灌注可致視網(wǎng)膜組織中游離Glu濃度升高,是造成視網(wǎng)膜組織損傷的可能機制之一;而雌激素可以通過阻止Glu濃度升高,從而保護了視網(wǎng)膜組織。 Fas/Fas-L在兔視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷組織中表達升高,視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞凋亡明顯增多,表明Fas/Fas-L及其介導的細胞凋亡是視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷機制之一;雌激素可明顯抑制Fas/Fas-L在視網(wǎng)膜缺血/再灌注損傷中的表達和視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞凋亡,表明雌激素可能通過抑制Fas/Fas-L的
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