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文檔簡介
1、該研究旨在制備bFGF-PLGA微球,討論bFGF-PLGA微球促進隨意皮瓣早期斷蒂.從而最大限度地發(fā)揮bFGF的治療作用,并為研制開發(fā)諸多細胞因子緩釋系統(tǒng)奠定基礎(chǔ).以4%的PLGA作為油相、5%PVA作為外水相,通過復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備bFGF-PLGA微球,采用<'60>Co輻照滅菌.觀察微球的形態(tài)、粒徑分布;計算微球的產(chǎn)率;通過MicroBCA<'TM>蛋白檢測法測定微球中bFGF的含量,計算載藥量和包裹率;模擬體內(nèi)環(huán)境,觀察微球內(nèi)
2、藥物體外釋放的情況;將微球作用于體外培養(yǎng)的成纖維細胞,流式細胞儀檢測成纖維細胞增殖情況,了解微球內(nèi)藥物的活性.建立大鼠背部隨意皮瓣早期斷蒂的動物模型,將bFGF-PLGA微球注入皮瓣下方,4天后斷蒂,斷蒂后10天觀察皮瓣壞死率、新生微血管數(shù)量,并與單獨使用bFGF組進行對比.采用復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備的bFGF-PLGA微球,表面光滑,成球率達98%.微球的平均粒徑為12.6μm.微球產(chǎn)率為65.4%,載藥量和包裹率分別為0.31μg/ml
3、和53%.<'60>Co輻照進行滅菌,滅菌效果滿意.對藥物的體外釋放發(fā)現(xiàn),前3天釋放藥物總量的1/2以上,說明制備的微球體外藥物釋放過程中存在著突釋現(xiàn)象,3天后藥物的釋放趨于穩(wěn)定.而且藥物在20天內(nèi)基本釋放完全.流式細胞儀檢測經(jīng)bFGF-PLGA微球作用10天后的成纖維細胞,S期的細胞比例從作用3天時的48.10%降至31.02%,但仍高于細胞初始狀態(tài)時的23.85%,說明培養(yǎng)第10天時,仍有bFGF從微球中釋放出來并作用于成纖維細胞.
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