急性出血性壞死性胰腺炎肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景目的:
　　急性出血性壞死性胰腺炎(acute hemorrhagic necrotiting pancreatitis, AHNP)是臨床普外科常見急腹癥之一,具有發(fā)病急、病程進(jìn)展快、病死率高等特點(diǎn),其除引起胰腺局部損傷外,尚可出現(xiàn)胰外多器官的損傷。急性肺損傷(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是最常見的一種早期

2、并發(fā)癥。研究表明,AHNP一周內(nèi)死亡的病人,大約60％是伴有肺損傷或ARDS[1]。近年來不少學(xué)者針對胰腺炎合并肺損傷的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了大量研究,但仍有不少發(fā)病環(huán)節(jié)尚未完全闡明,因此研究急性胰腺炎(acute hepancreatitis,AP)合并肺損傷的發(fā)病機(jī)制,進(jìn)而降低AP患者死亡率已成為臨床上迫切需要解決的問題。在本實(shí)驗(yàn)中,我們將擬用大鼠AHNP模型,通過動態(tài)觀察早期肺內(nèi)部分炎癥因子、Caspase表達(dá)等變化,以探討AHNP肺損傷

3、的部分機(jī)制。
　　方法:
　　雄性Wistar大鼠80只,隨機(jī)分成急性出血性壞死性胰腺炎組(AHNP組, n=40)和對照組(Control組,n=40)。AHNP組于剖腹后沿胰腺被膜下均勻注射5%牛磺膽酸鈉1ml以制成AHNP模型;Control組僅作剖腹手術(shù)。兩組于術(shù)后各取10只觀察48h內(nèi)大鼠死亡情況。另各組于2、6、12、24、48h各取6只大鼠處死:取左心室血液行動脈血?dú)夥治鲆詸z測肺功能指標(biāo)PaCO2、PaO2;取

4、頸靜脈血利用對硝基-苯麥芽庚糖法檢測血清淀粉酶活性變化;取肺組織粉碎后,利用EliSA方法檢測肺組織勻漿中TNF-α、IL-6的含量,同時利用硫代巴比妥酸法和黃嘌呤氧化酶法分別檢測勻漿中MDA、SOD的含量變化;取肺臟組織測定肺濕/干比值;取肺臟組織常規(guī)制片,利用快速免疫組化檢測肺組織Caspase-3蛋白表達(dá),利用HE染色觀察肺組織病理改變并給予病理評分。
　　結(jié)果:
　　1.死亡率比較,AHNP組12h內(nèi)死亡1只,12~

5、24h內(nèi)死亡2只,24~48h內(nèi)死亡2只,48h內(nèi)總死亡率為5/10=50%,Control組無大鼠死亡,兩組死亡率比較有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。
　　2.血清淀粉酶活性AHNP組于2h開始升高,12h到達(dá)高峰,以后下降,6、12、24、48h其活性同Control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.01)。
　　3.動脈血?dú)夥治鲋?二氧化碳分壓(PaCO2)與氧分壓(PaO2)2h開始下降,其最低值分別在6h與48h出現(xiàn),P

6、aCO2在2、6、12h同Control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05),PaO2在12、24、48h同Control組比較差異均有顯著性(P<0.05)。
　　4.肺組織勻漿中TNF-α于2h開始升高、48h達(dá)到高峰,2、6、12、24、48h與Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05);IL-6于6h開始升高、48h達(dá)到高峰,在6、12、24、48h與Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。
　

7、　5.肺組織勻漿中MDA均于2h開始升高,48h達(dá)到高峰,在2、6、12、24、48h與Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05);SOD在2h開始降低,24h達(dá)到低谷,在6、12、24、48h同Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.01)。
　　6.肺組織濕/干比率2h開始升高,48達(dá)到高峰,6、12、24、48h同Control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05).
　　7.肺組織Caspase-3蛋白表

8、達(dá)在6h升高,48h到高峰,12、24、48同Control組比較差異均有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。
　　8.肺組織在2h出現(xiàn)病理改變,表現(xiàn)為肺泡和間質(zhì)水腫,少量炎細(xì)胞浸潤,輕度出血;48h病變達(dá)高峰,表現(xiàn)為肺泡和間質(zhì)廣泛嚴(yán)重水腫、出血,灶性或片狀肺不張,大量炎細(xì)胞浸潤、聚集成團(tuán);病理損害評分同病理改變趨勢相一致。
　　結(jié)論:
　　1.AHNP早期即出現(xiàn)肺損傷,其損傷不僅表現(xiàn)在形態(tài)學(xué)上,而且表現(xiàn)在功能學(xué)上。